1購買試管斜面種，冰箱恆溫儲存備用。

2、搖瓶種的製作：

（1）培養基的配製：

按液體培養基的配料辦法按一定的配比製作培養基（土豆170克 麩皮30克，葡萄糖20克、磷酸二氫鉀3克、硫酸鎂1.5克 ）

（2）裝瓶

500毫升的三角瓶裝料150毫升

（3）蓋棉塞、綁牛皮紙

棉塞外包一層紗布，大小要合適，上面加蓋一層牛皮紙，用線繩綁好。

（4）滅菌

0.12-0.13Pma)的條件下滅菌30分鐘。

（5）接種

培養基溫度降至30度以下時，將經過提純活化處理的母種在無菌條件下用接種鉤接入三角瓶，每瓶接入2-3塊1cm的菌塊，使菌塊儘量漂浮在液麵上。

（6）培養

把接好種的搖瓶置搖床（或靜置24小時後）在20―25度的條件下振盪培養，一般4-5天即可長好。會見瓶裡有大量基本均勻、活力旺盛的菌球。

培養終點及質量好壞的判斷

①菌球形態：菌種長好後會看到菌瓶內充滿大小均勻，活力旺盛，毛刺明顯的大量菌球，靜置5分鐘後菌球佔菌液濃度的50％以上或不分層，若菌球很少或大小不一值可能是質量有問題。

② 菌液澄清度：菌液中除菌球以外，無其它固形物，菌液由前期的微渾濁變的澄清透明，多數是淺黃色或橙黃色,如變的渾濁不清則很可能是染菌