⑴底物對酶促反應的飽和現象：由實驗觀察到，在酶濃度不變時，不同的底物濃度與反應速度的關係為一矩形雙曲線，即當底物濃度較低時，反應速度的增加與底物濃度的增加成正比（一級反應）；此後，隨底物濃度的增加，反應速度的增加量逐漸減少（混合級反應）；最後，當底物濃度增加到一定量時，反應速度達到一最大值，不再隨底物濃度的增加而增加（零級反應）。
⑵米氏方程及米氏常數：根據上述實驗結果，Michaelis & Menten 於1913年推匯出了上述矩形雙曲線的數學表示式，即米氏方程： ν= Vmax[S]/(Km+[S])。其中，Vmax為最大反應速度，Km為米氏常數。
⑶Km和Vmax的意義：
①當ν=Vmax/2時，Km=[S]。因此，Km等於酶促反應速度達最大值一半時的底物濃度。
②當k-1>>k+2時，Km=k-1/k+1=Ks。因此，Km可以反映酶與底物親和力的大小，即Km值越小，則酶與底物的親和力越大；反之，則越小。
③Km可用於判斷反應級數：當[S]<0.01Km時，ν=（Vmax/Km）[S]，反應為一級反應，即反應速度與底物濃度成正比；當[S]>100Km時，ν=Vmax，反應為零級反應，即反應速度與底物濃度無關；當0.01Km<[S]<100Km時，反應處於零級反應和一級反應之間，為混合級反應。
④Km是酶的特徵性常數：在一定條件下，某種酶的Km值是恆定的，因而可以透過測定不同酶（特別是一組同工酶）的Km值，來判斷是否為不同的酶。
⑤Km可用來判斷酶的最適底物：當酶有幾種不同的底物存在時，Km值最小者，為該酶的最適底物。
⑥Km可用來確定酶活性測定時所需的底物濃度：當[S]=10Km時，ν=91%Vmax，為最合適的測定酶活性所需的底物濃度。
⑦Vmax可用於酶的轉換數的計算：當酶的總濃度和最大速度已知時，可計算出酶的轉換數，即單位時間內每個酶分子催化底物轉變為產物的分子數。
⑷Km和Vmax的測定：主要採用Lineweaver-Burk雙倒數作圖法和Hanes作圖法。
⑴底物對酶促反應的飽和現象：由實驗觀察到，在酶濃度不變時，不同的底物濃度與反應速度的關係為一矩形雙曲線，即當底物濃度較低時，反應速度的增加與底物濃度的增加成正比（一級反應）；此後，隨底物濃度的增加，反應速度的增加量逐漸減少（混合級反應）；最後，當底物濃度增加到一定量時，反應速度達到一最大值，不再隨底物濃度的增加而增加（零級反應）。
⑵米氏方程及米氏常數：根據上述實驗結果，Michaelis & Menten 於1913年推匯出了上述矩形雙曲線的數學表示式，即米氏方程： ν= Vmax[S]/(Km+[S])。其中，Vmax為最大反應速度，Km為米氏常數。
⑶Km和Vmax的意義：
①當ν=Vmax/2時，Km=[S]。因此，Km等於酶促反應速度達最大值一半時的底物濃度。
②當k-1>>k+2時，Km=k-1/k+1=Ks。因此，Km可以反映酶與底物親和力的大小，即Km值越小，則酶與底物的親和力越大；反之，則越小。
③Km可用於判斷反應級數：當[S]<0.01Km時，ν=（Vmax/Km）[S]，反應為一級反應，即反應速度與底物濃度成正比；當[S]>100Km時，ν=Vmax，反應為零級反應，即反應速度與底物濃度無關；當0.01Km<[S]<100Km時，反應處於零級反應和一級反應之間，為混合級反應。
④Km是酶的特徵性常數：在一定條件下，某種酶的Km值是恆定的，因而可以透過測定不同酶（特別是一組同工酶）的Km值，來判斷是否為不同的酶。
⑤Km可用來判斷酶的最適底物：當酶有幾種不同的底物存在時，Km值最小者，為該酶的最適底物。
⑥Km可用來確定酶活性測定時所需的底物濃度：當[S]=10Km時，ν=91%Vmax，為最合適的測定酶活性所需的底物濃度。
⑦Vmax可用於酶的轉換數的計算：當酶的總濃度和最大速度已知時，可計算出酶的轉換數，即單位時間內每個酶分子催化底物轉變為產物的分子數。
⑷Km和Vmax的測定：主要採用Lineweaver-Burk雙倒數作圖法和Hanes作圖法。