免疫組化是利用抗原與抗體間的特異結合原理和特殊的標記技術,對組織和細胞內的特定抗原、抗體進行定位、定性、定量的一們技術。我們都是先進行免疫組化,在DAB染色後進行HE染色。既能看到免疫組化的結果,又能看到細胞的形態,CD34+免疫組化染色後是棕色的顆粒,效果很好。
1)做免疫組化的片子最好不要同時做HE染色,因為那樣會掩蓋陽性著色的結果;而且用蘇木素復染細胞核也是淡染,若要在免疫組化的片子上觀察形態學的改變,除非有非常典型的表現,一般是有很大的難度的。
2)你是培養的細胞做免疫組化嗎?如果是的話,那就每個樣本只有一張片子吧?唯一的辦法是進行免疫雙染,同時做CD34和AFP(甲胎蛋白)。我覺得後者陽性便可以或多或少的獲得向肝細胞分化的證據。
3)用HE染色來識別造血幹細胞向肝細胞分化,也就是說要看到肝細胞的典型形態學改變後才可以下結論。問題是:早期的肝細胞僅憑形細胞態學觀察並不能很容易的被識別。病理大夫看組織切片,重要的是看其組織學結構,對肝細胞也是這樣。如果單拿出來一個細胞,還是培養的細胞,染色後真的不容易區分。所以我覺得你設計的用HE染色來確定早期細胞向哪個方向分化不是很有說服力。
4)如果是切片,也就是說每個樣本可以有多張切片,那可以在連續切片上分別染CD34和AFP,拍照時選擇相同視野,也有一定說服力。但是還是不如雙染法更可靠。
5)用雙染最大的問題在於:這兩者都表達在胞漿中,染色容易相互覆蓋。所以在雙染的方法選擇上你還要再考慮一下,可不可以用免疫熒光雙染?這樣也很有說服力的
免疫組化是利用抗原與抗體間的特異結合原理和特殊的標記技術,對組織和細胞內的特定抗原、抗體進行定位、定性、定量的一們技術。我們都是先進行免疫組化,在DAB染色後進行HE染色。既能看到免疫組化的結果,又能看到細胞的形態,CD34+免疫組化染色後是棕色的顆粒,效果很好。
1)做免疫組化的片子最好不要同時做HE染色,因為那樣會掩蓋陽性著色的結果;而且用蘇木素復染細胞核也是淡染,若要在免疫組化的片子上觀察形態學的改變,除非有非常典型的表現,一般是有很大的難度的。
2)你是培養的細胞做免疫組化嗎?如果是的話,那就每個樣本只有一張片子吧?唯一的辦法是進行免疫雙染,同時做CD34和AFP(甲胎蛋白)。我覺得後者陽性便可以或多或少的獲得向肝細胞分化的證據。
3)用HE染色來識別造血幹細胞向肝細胞分化,也就是說要看到肝細胞的典型形態學改變後才可以下結論。問題是:早期的肝細胞僅憑形細胞態學觀察並不能很容易的被識別。病理大夫看組織切片,重要的是看其組織學結構,對肝細胞也是這樣。如果單拿出來一個細胞,還是培養的細胞,染色後真的不容易區分。所以我覺得你設計的用HE染色來確定早期細胞向哪個方向分化不是很有說服力。
4)如果是切片,也就是說每個樣本可以有多張切片,那可以在連續切片上分別染CD34和AFP,拍照時選擇相同視野,也有一定說服力。但是還是不如雙染法更可靠。
5)用雙染最大的問題在於:這兩者都表達在胞漿中,染色容易相互覆蓋。所以在雙染的方法選擇上你還要再考慮一下,可不可以用免疫熒光雙染?這樣也很有說服力的