染色時應注意事項

在進行HE染色時還應注意以下問題：

1．組織切片的脫蠟步驟應徹底，否則無論進行那種染色都會發生困難。脫蠟時間要充分，若溶蠟劑使用過久應及時更換以免效率降低，若室溫過低，可將溶蠟劑置於溫箱中進行脫蠟。

2．蘇木素染液使用一段時間後表面易出現亮晶狀飄浮物，這可能是液體表面的過氧化物，必須過濾除去，以防沉渣汙染組織切片。蘇木素液一般染過三、四百張切片後，著色力會減弱，著色不鮮豔，呈灰藍色時應及時更換新液。

3．染色的時間長短需依據：染劑對組織的染色作用，室溫條件，切片厚薄，固定液的類別，染液的新舊而進行調節。所以在染色時必須使用顯微鏡觀察染色程度以利掌握時間。

4．分化十分重要。分化步驟的準確也是染色成敗的關鍵，若分化失當則必然引起染色不勻或過淡，過深等現象，因此分化後一定要鏡檢，觀察胞核是否清晰，胞漿呈淡白色。否則需再次分化，不然一旦復染後，組織會呈紫藍色即“藍蓋紅”現象。

5．還原液不宜過濃，若鹼性太強易使組織脫落故以淡為宜。

6．伊紅宜淡染，復染過深胞核會不清晰，影響鏡檢。

7．若脫水，透明等步驟不夠徹底，則組織表面會有一層霧狀膜。若有這一現象，應立即更換純酒精脫水，再次透明。在潮溼的季節裡應注意酒精的濃度、若降低要及時更換。

8．染色後的組織切片、要將組織四周的汙染物痕跡擦掉，以免影響美觀。

9．封固劑要適量，滴加時應小心傾滴，蓋玻片要輕輕放置，以免氣泡產生影響鏡檢。蓋玻片大小選擇要合適，一般要大於組織塊，以防封蓋不全，蓋玻片要放正，標籤貼牢，編號清楚。從而保證切片的封藏和美觀。

10．染好的切片應妥為儲存，更應避免日光照射，否則切片容易褪色。