血液塗片製備魚染色的目的:
掌握血塗片的製備和染色方法
血液塗片製備魚染色的原理:
將一小滴血液均勻塗在玻片上,呈單層緊密分佈,製成薄血片。用含天青B和伊紅的Romannowsky類染料進行染色。細胞中的鹼性物質如RBC中的血紅蛋白及嗜酸性粒細胞胞質中的嗜酸性顆粒等與酸性染料伊紅結合染成紅色;細胞中的酸性物質如淋巴細胞胞質及嗜鹼性粒細胞質中的嗜鹼性顆粒等與鹼性染料亞甲藍結合染成藍色;中性粒細胞的中性顆粒呈等電狀態與伊紅和美藍均可結合,染成淡紫紅色。
血液塗片製備魚染色的注意事項:
瑞氏染液
新鮮配製的染液偏鹼,染色效果較差,經在室溫下貯存一定時間,美藍逐漸轉變為天青B後方可使用,這一過程稱染料成熟。放置時間愈久,天青B愈多,染色效果愈好,但必須蓋嚴瓶口,以免甲醇揮發或氧化成甲酸。甲醇必須用AR(無丙酮)。染液中也可加中性甘油3ml,防止甲醇揮發,使細胞染色較清晰。
採血(1)不能採集以下部位的血液:①示指或拇指血液。②感染部位血液,如甲溝炎。③耳垂部位血液,含單核細胞太多。 (2)不能使用肝素抗凝標本。 (3)玻片必須清潔、乾燥、無塵。①新玻片:應在清潔液中浸泡過夜,然後用水沖洗,最後用蒸餾水沖洗。②已用過的玻片:應在60℃清潔液中加熱20min,然後用水沖洗,最後用蒸餾水沖洗。③邊緣破碎、表面有劃痕的玻片不能再用。 (4)使用玻片時,只能手持玻片邊緣,切勿觸及玻片表面,以保持玻片清潔、乾燥、中性、無油膩。
製作塗片
許多因素可影響血塗片的厚度,針對不同患者應有的放矢,對血細胞比容高、血粘度高的患者應採用小血滴、小角度、慢推;而貧血患者則應採用大血滴、大角度、快推。
乾燥塗片
血塗片乾透後方可固定染色,否則細胞尚未牢固地吸附在玻片上,在染色過程中容易脫落。
血液塗片製備魚染色的目的:
掌握血塗片的製備和染色方法
血液塗片製備魚染色的原理:
將一小滴血液均勻塗在玻片上,呈單層緊密分佈,製成薄血片。用含天青B和伊紅的Romannowsky類染料進行染色。細胞中的鹼性物質如RBC中的血紅蛋白及嗜酸性粒細胞胞質中的嗜酸性顆粒等與酸性染料伊紅結合染成紅色;細胞中的酸性物質如淋巴細胞胞質及嗜鹼性粒細胞質中的嗜鹼性顆粒等與鹼性染料亞甲藍結合染成藍色;中性粒細胞的中性顆粒呈等電狀態與伊紅和美藍均可結合,染成淡紫紅色。
血液塗片製備魚染色的注意事項:
瑞氏染液
新鮮配製的染液偏鹼,染色效果較差,經在室溫下貯存一定時間,美藍逐漸轉變為天青B後方可使用,這一過程稱染料成熟。放置時間愈久,天青B愈多,染色效果愈好,但必須蓋嚴瓶口,以免甲醇揮發或氧化成甲酸。甲醇必須用AR(無丙酮)。染液中也可加中性甘油3ml,防止甲醇揮發,使細胞染色較清晰。
採血(1)不能採集以下部位的血液:①示指或拇指血液。②感染部位血液,如甲溝炎。③耳垂部位血液,含單核細胞太多。 (2)不能使用肝素抗凝標本。 (3)玻片必須清潔、乾燥、無塵。①新玻片:應在清潔液中浸泡過夜,然後用水沖洗,最後用蒸餾水沖洗。②已用過的玻片:應在60℃清潔液中加熱20min,然後用水沖洗,最後用蒸餾水沖洗。③邊緣破碎、表面有劃痕的玻片不能再用。 (4)使用玻片時,只能手持玻片邊緣,切勿觸及玻片表面,以保持玻片清潔、乾燥、中性、無油膩。
製作塗片
許多因素可影響血塗片的厚度,針對不同患者應有的放矢,對血細胞比容高、血粘度高的患者應採用小血滴、小角度、慢推;而貧血患者則應採用大血滴、大角度、快推。
乾燥塗片
血塗片乾透後方可固定染色,否則細胞尚未牢固地吸附在玻片上,在染色過程中容易脫落。