QIAGEN試劑盒提取總RNA的步驟

植物材料

用最精確的方法,稱取不超過100mg的植物材料,置於處理過的研缽,加入液氮進行研磨

將研磨得到的粉末,快速轉移至無RNase,並經過液氮冷卻的2mL離心管(自備),注意材料要保持冷凍狀態

加入450礚 Buffer RLT（1mL 加入10μL β-巰基乙醇）,顛倒混勻,渦旋

將溶解物轉移至於淡紫色的QIAshredder spin column,最大轉速離心2分鐘,取上清轉移至新的2mL的收集管（自備）

加0.5倍體積（約225μL）的無水乙醇,迅速吹打混勻

將樣品(約650μL )轉移至帶有2mL回收管的粉色RNeasy spin column（以下簡稱column）,>=8000g離心15s,將濾出物丟棄

加入700礚 Buffer RW1至column,>=8000g離心15s清洗柱子上的濾膜,丟棄濾出物和收集管

轉移column至新的收集管（提供）,加入500 礚 Buffer RPE,>=8000g離心15s清洗柱子上的濾膜,丟棄濾出物

再加入500礚 Buffer RPE,>=8000g離心2分鐘清洗柱子上的濾膜

(為了保證除淨Buffer RPE,可棄舊的收集管和濾出物,取新收集管(自備)

最大轉速離心1分鐘)

轉移RNeasy spin column至1.5mL收集管（提供）,加入30-50禡 無RNA酶的水於濾膜上,>=8000g離心1分鐘,洗脫RNA

（如果預期得到的RNA大於20礸,可重複第十步）

或者看說明書最好了