微生物的基因操作技術有：核酸的凝膠電泳、核酸的分子雜交技術、DNA 序列分析、基 因的定點誘變、細菌的轉化、利用 DNA 與蛋白質的相互作用進行核酸研究、PCR 技術等。 基因定點突變(site-directed mutagenesis)：透過改變基因特定位點核苷酸序列來改變所編 碼的氨基酸序列，用於研究氨基酸殘基對蛋白質的結構、催化活性以及結合配體能力的影響， 也可用於改造 DNA 調控元件特徵序列、修飾表達載體、引入新的酶切位點等。主要採用兩 種 PCR 方法，包括重疊延伸技術和大引物誘變法。在硫化細菌核苷水解酶對底物專一性的研 究中，採用定點突變技術，對編碼 221 位和 228 位氨基酸的 DNA 序列進行突變，改變兩個位點的氨基酸，從而研究氨基酸殘基對底物結合的影響。 基因敲除(gene knock-out)：又稱基因打靶，透過外源 DNA 與染色體 DNA 之間的同源重 組，進行精確的定點修飾和基因改造，具有專一性強、染色體 DNA 可與目的片段共同穩定 遺傳等特點，可分為完全基因敲除和條件型基因敲除。在穀氨酸棒桿菌生產纈氨酸的研究中，採用基因敲除的方法進行高產菌株構建。如 ilvA 基因敲除，使蘇氨酸脫氨酶的合成減少，降低異亮氨酸合成的前體，從而減少異亮氨酸的合成，增加纈氨酸的生成。
微生物的基因操作技術有：核酸的凝膠電泳、核酸的分子雜交技術、DNA 序列分析、基 因的定點誘變、細菌的轉化、利用 DNA 與蛋白質的相互作用進行核酸研究、PCR 技術等。 基因定點突變(site-directed mutagenesis)：透過改變基因特定位點核苷酸序列來改變所編 碼的氨基酸序列，用於研究氨基酸殘基對蛋白質的結構、催化活性以及結合配體能力的影響， 也可用於改造 DNA 調控元件特徵序列、修飾表達載體、引入新的酶切位點等。主要採用兩 種 PCR 方法，包括重疊延伸技術和大引物誘變法。在硫化細菌核苷水解酶對底物專一性的研 究中，採用定點突變技術，對編碼 221 位和 228 位氨基酸的 DNA 序列進行突變，改變兩個位點的氨基酸，從而研究氨基酸殘基對底物結合的影響。 基因敲除(gene knock-out)：又稱基因打靶，透過外源 DNA 與染色體 DNA 之間的同源重 組，進行精確的定點修飾和基因改造，具有專一性強、染色體 DNA 可與目的片段共同穩定 遺傳等特點，可分為完全基因敲除和條件型基因敲除。在穀氨酸棒桿菌生產纈氨酸的研究中，採用基因敲除的方法進行高產菌株構建。如 ilvA 基因敲除，使蘇氨酸脫氨酶的合成減少，降低異亮氨酸合成的前體，從而減少異亮氨酸的合成，增加纈氨酸的生成。