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  • 1 # 使用者8616219450500

    一般用nanodrop測,1μl就可以了。如果沒有,跑膠可以估測。可以比較條帶與marker中分子量比較接近的條帶的灰度,再根據marker的量計算出大致的濃度。做連線用不了多少DNA的。根據你說的情況,我覺得你的樣品濃度分別大概在30和15左右。

    一般都是用nanodrop測定DNA和RNA的濃度,用量只需要1ul

    沒有嚴格要求的話一般不用測濃度,2號樣取1ul做連線就可以了。

    一般用nanodrop測,1μl就可以了。如果沒有,跑膠可以估測。可以比較條帶與marker中分子量比較接近的條帶的灰度,再根據marker的量計算出大致的濃度。做連線用不了多少DNA的。根據你說的情況,我覺得你的樣品濃度分...

    連線時用跑膠的方法估算濃度就可以,也不必太準確。你的結果,可估算載體約10ng,片段1約50ng,片段2約30-40ng,連線時載體取2-3ul,其餘加片段就可以了。載體不必太多,太多反而會產生太多自連線的,片段儘量多加吧。我做連線轉化成功率可是特別高的。

    質粒濃度低就全加吧,目的基因相應的也多加一點。我之前做過一次,濃度比這還低,條帶猛一看就看不出來,純粹是練手的心態繼續往下做,最後竟然轉化成功了。就算做不出來重頭再來嘛

  • 2 # 使用者8422074449321

    我自己當時毛估的方法(舉例TAKARA 250 bp DNA Ladder Marker):

    這是公司說明書:

    約500 ng/ 5μl

    本製品由雙鏈DNA片段250 bp、500 bp、750 bp、1000 bp、1500 bp、2250 bp、3000 bp、4500 bp組成,共8條帶。其中1000 bp的DNA片段為指示帶,顯示亮帶。本品已混有上樣緩衝液,可直接用於凝膠電泳。

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