革蘭氏染色法的原理：簡單來說：透過結晶紫初染和碘液媒染後，在細菌細胞壁內形成了不溶於水的結晶紫與碘的複合物，再用95%乙醇脫色。具體來說：透過結晶紫初染和碘液媒染後，在細胞壁內形成了不溶於水的結晶紫與碘的複合物，革蘭氏陽性菌由於其細胞壁較厚、肽聚糖網層次較多且交聯緻密，故遇乙醇脫色處理時，因失水反而使網孔縮小，再加上它不含類脂，故乙醇處理不會出現縫隙，因此能把結晶紫與碘複合物牢牢留在壁內，使其仍呈紫色;而革蘭氏陰性菌因其細胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄且交聯度差，在遇脫色劑後，以類脂為主的外膜迅速溶解，薄而鬆散的肽聚糖網不能阻擋結晶紫與碘複合物的溶出，因此透過乙醇脫色後仍呈無色，再經沙黃等紅色染料復染，就使革蘭氏陰性菌呈紅色。G﹢菌:細胞壁厚，肽聚糖網狀分子形成一種透性屏障，當乙醇脫色時，肽聚糖脫水而孔隙縮小，故保留結晶紫-碘複合物在細胞膜上。呈紫色。Gˉ菌:肽聚糖層薄，交聯鬆散，乙醇脫色不能使其結構收縮，其脂含量高,乙醇將脂溶解，縫隙加大，結晶紫-碘複合物溶出細胞壁，番紅染液復染後呈紅色。擴充套件資料：革蘭氏染色法，是指細菌學中廣泛使用的一種重要的鑑別染色法，屬於復染法。這種染色法是由丹麥醫生革蘭於1884年所發明，最初是用來鑑別肺炎球菌與克雷伯肺炎菌。革蘭染色法一般包括初染、媒染、脫色、復染等四個步驟。未經染色的細菌，由於其與周圍環境折光率差別甚小，故在顯微鏡下極難區別。經染色後，陽性菌呈紫色，陰性菌呈紅色，可以清楚地觀察到細菌的形態、排列及某些結構特徵，從而用以分類鑑定。操作流程：革蘭氏染色法一般包括初染、媒染、脫色、復染等四個步驟，具體操作方法是：（1）載玻片固定。在無菌操作條件下，用接種環挑取少量細菌於乾淨的載玻片上塗布均勻，在火焰上加熱以殺死菌種並使其粘附固定。（2）草酸銨結晶紫染1分鐘。（3）自來水沖洗，去掉浮色。（4) 用碘-碘化鉀溶液媒染1分鐘，傾去多餘溶液。（5）用中性脫色劑如乙醇（95%）或丙酮酸脫色30秒，革蘭氏陽性菌不被褪色而呈紫色，革蘭氏陰性菌被褪色而呈無色。酒精脫色為整個流程最關鍵的一步。（6）用蕃紅染液或者沙黃復染30秒，革蘭氏陽性菌仍呈紫色，革蘭氏陰性菌則呈現紅色。革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌即被區別開。