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  • 1 # 使用者2311390594403

    一般來說,細胞的計數方法是:細胞數/mL=4個大格細胞總數/4×10000×稀釋倍

    操作步驟:

    1.取10ul細胞懸液與10ul臺盼蘭混合均勻於1.5ml離心管中。

    2.蓋上蓋玻片,取10ul混合液自血球計數盤上方加入,於10倍生物顯微鏡下觀察,活細胞不染色,死細胞被染成藍色。

    3.分別計數四個大方格,得到細胞總數,再除以4,乘以稀釋倍數(本實驗為2),最後乘以104,即為每ml細胞懸液中細胞數。若細胞位於線上,只計上線與左線(計上不計下,計左不計右)。

    注:

    1.細胞數/ml=4大格細胞總數×稀釋倍數×104/4;每一大格的體積為=0.1cm×0.1cm×0.01cm=10-4ml

    2.計數板計數時,最適細胞濃度為5~10×105個/ml,此範圍外計數誤差偏大。

    3.高濃度細胞懸液,可取出部分作稀釋或連續稀釋後計數。

    活細胞數/方格:55,62,49,59;死細胞數/方格:5,3,4,6;細胞總數=243

    平均細胞數/方格=60.75;稀釋倍數=2;

    細胞數/ml:60.75×104×2=1.22×106;

    細胞數/flask(10ml):1.22×106×10ml=12.2×106

    存活率:225/243﹦92.6%

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