母牛配種後，若不再表現發情，則需要確定母牛是否妊娠。

常用的方法有外部觀察法、陰道檢查法和直腸觸診法。（1）外部觀察法 觀察母牛的外部變化和行為。當母牛配種後周期性的發情停止；母牛的採食量和飲水量逐漸增加；營養狀況改善，毛色潤澤，膘情變好。行為上發生明顯的改變，如性情變得溫馴、行動遲緩，常躲避角鬥或追逐，放牧或驅趕運動時，常落在牛群之後。妊娠中後期腹圍增大，右側腹壁突出，可觸到或看到胎動。初產母牛乳房發育加快，妊娠4～5個月後乳房體積明顯增大。外部觀察法雖然簡單易行，但一般不能進行早期妊娠診斷且準確率差。（2）陰道檢查法 根據陰道黏膜色澤、黏液分泌及子宮頸狀態等確定母牛是否妊娠，該法常作為母牛妊娠診斷的輔助方法。正常情況下，母牛妊娠3周後，陰道黏膜由未孕時的淡粉紅色變為蒼白色，沒有光澤，表面乾燥。當開膣器插入陰道時，阻力明顯，有乾澀感，同時陰道收縮變緊。陰道黏液的變化較為明顯，妊娠40～60天，子宮頸口附近有少量黏稠黏液，3～4個月，黏液量增多變為濃稠、灰白或灰黃，形如糨糊。妊娠母牛的子宮頸口偏向一側，呈閉鎖狀態，有糨糊狀灰暗的黏液塊堵塞於子宮頸口，稱為子宮頸塞（栓），保護胎兒免遭外界病菌的侵入。子宮栓在分娩或流產前溶解，並呈線狀流出體外。（3）直腸觸診法 用手隔著直腸觸控卵巢、子宮、胎兒和胎膜的變化情況，並由此判斷牛的妊娠。該法應用也較普遍，對於牛早期的妊娠診斷比較準確。妊娠早期的直腸檢查主要根據子宮角和卵巢黃體的變化進行判斷，後期的直腸檢查主要根據子宮中動脈特異脈搏等的變化和胎兒的存在進行判斷。生殖器官的變化隨妊娠時間的不同而有所側重。牛妊娠不同月份直腸檢查情況見表24。表24　母牛妊娠不同月份直腸檢查情況 早期的胚胎比較脆弱，胎兒和子宮的聯絡也正在建立之中，故操作時必須細心、輕柔，避免魯莽而造成妊娠母牛的流產。奶牛的妊娠診斷除上述幾種方法外，還有超聲波診斷，乳汁和血液孕酮分析法等。配種後22～24天可採用放射免疫和酶聯免疫進行早期妊娠診斷；配種後30～60天可採用超聲波進行妊娠診斷。一般在配種後60～90天採用直腸檢查法進行妊娠診斷。有條件時可在配種後4～5個月檢查一次，掌握妊娠情況；停奶前（大約7個月時）再檢查一次，防止漏檢牛或流產牛停奶。