考馬斯亮藍法（Bradford法）測定蛋白質濃度
1、試劑：
（1）考馬斯亮藍試劑：
考馬斯亮藍G—250 100mg溶於50ml 95%乙醇，加入100ml 85% H3PO4，用蒸餾水稀釋至1000ml, 濾紙過濾。最終試劑中含0.01%（W/V）考馬斯亮藍G—250, 4.7%（W/V）乙醇，8.5%（W/V）H3PO4。
（2）標準蛋白質溶液：
純的牛血清血蛋白，根據其純度同0.15mol/L NaCl配製成100 ug/ml蛋白溶液。
2. 器材： （1）可見光分光光度計 （2）旋渦混合器
3、標準曲線的製作
試管編號 0 1 2 3 4 5 6
100ug/ml標準蛋白（ml） 0.0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6
0.15mol/L NaCl （ml） 1 0.9 0.8 0.7 0.6 0.5 0.4
考馬斯亮藍試劑 （ml） 5 5 5 5 5 5 5
搖勻，1h內以0號管為空白對照,在595nm處比色
A595nm
以A595nm為縱座標，標準蛋白含量為橫座標（六個點為10ug、20 ug、30 ug、40 ug、50 ug、60 ug），在座標軸上繪製標準曲線。
4、樣品中蛋白質含量的測定
另取兩支幹淨的試管（做一重複），加入合適濃度的待測樣品，使其測定值在標準曲線的範圍內，測定方法同上，由樣品液的吸光度查標準曲線即可求出含量。
注意事項：
1、 如果要求嚴格，最好在試劑加入後的5~20min內測定光 吸收，因為這段時間內顏色是最穩定的。
2、 若選擇在旋渦混合器上混合，注意不要太劇烈，以免產生大量氣泡而難於消除。
考馬斯亮藍法（Bradford法）測定蛋白質濃度
1、試劑：
（1）考馬斯亮藍試劑：
考馬斯亮藍G—250 100mg溶於50ml 95%乙醇，加入100ml 85% H3PO4，用蒸餾水稀釋至1000ml, 濾紙過濾。最終試劑中含0.01%（W/V）考馬斯亮藍G—250, 4.7%（W/V）乙醇，8.5%（W/V）H3PO4。
（2）標準蛋白質溶液：
純的牛血清血蛋白，根據其純度同0.15mol/L NaCl配製成100 ug/ml蛋白溶液。
2. 器材： （1）可見光分光光度計 （2）旋渦混合器
3、標準曲線的製作
試管編號 0 1 2 3 4 5 6
100ug/ml標準蛋白（ml） 0.0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6
0.15mol/L NaCl （ml） 1 0.9 0.8 0.7 0.6 0.5 0.4
考馬斯亮藍試劑 （ml） 5 5 5 5 5 5 5
搖勻，1h內以0號管為空白對照,在595nm處比色
A595nm
以A595nm為縱座標，標準蛋白含量為橫座標（六個點為10ug、20 ug、30 ug、40 ug、50 ug、60 ug），在座標軸上繪製標準曲線。
4、樣品中蛋白質含量的測定
另取兩支幹淨的試管（做一重複），加入合適濃度的待測樣品，使其測定值在標準曲線的範圍內，測定方法同上，由樣品液的吸光度查標準曲線即可求出含量。
注意事項：
1、 如果要求嚴格，最好在試劑加入後的5~20min內測定光 吸收，因為這段時間內顏色是最穩定的。
2、 若選擇在旋渦混合器上混合，注意不要太劇烈，以免產生大量氣泡而難於消除。