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    【培養原理】

    1.DC培養用細胞因子:

    nGM-CSF(粒細胞巨噬細胞集落刺激因子):

    GM-CSF是一種造血生長因子,在體外可刺激中性粒細胞和巨噬細胞的集落形成,並具有促進早期紅巨核細胞、嗜酸性祖細胞增殖和發育的功能。GM-CSF是最早被鑑定出來對於DC有作用的細胞因子之一。

    GM-CSF在DC培養中的功能是促進單核細胞向大巨噬樣細胞分化,細胞表面MHC II類分子的表達得以提高,從而增強細胞的抗原遞呈功能。此外,GM-CSF還可促進DC的存活。

    nIL-4 (白細胞介素-4)

    IL-4在由單核細胞誘導成DC的過程中發揮的作用是抑制巨噬細胞的過度生長,從而引導單核細胞向DC方向分化。若培養體系中不加IL-4,單核細胞將分化為巨噬細胞。同時,IL-4還有降低細胞表面表達CD14分子的能力。CD14表達水平的降低是單核細胞分化為DC的重要標誌。

    GM-CSF和IL-4共同作用可使單核細胞定向分化為未成熟DC(immature DC),此時的DC具有較強的抗原攝取和加工能力,但抗原遞呈能力很弱。細胞表面中度表達MHC I類、II類分子和B7家族分子(CD80, CD86等),但不表達CD14。

    nTNF-a (腫瘤壞死因子-a)

    TNF-a可下調未成熟DC的巨胞飲作用和表面Fc受體的表達,使細胞內MHC II類分子區室(class II compartment)消失,但能夠上調細胞表面MHC I類、II類分子和B7家族分子(CD80, CD86等)的表達,使未成熟DC分化為成熟DC(mature DC),此時DC的抗原攝取和加工能力明顯減弱,而抗原遞呈能力顯著增強,可極強的啟用T細胞。

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