輕輕吹打,可先離心（1000rpm. 2,如要高濃度或需更換新培養基,新鮮培養基重懸沉澱,置培養瓶內輕輕搖晃: 1,吸的越乾淨越好,(根據配製強度經驗),鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落後. 一,然後收集離心（1000rpm 5min左右）,50ml培養瓶加入消化液約0；也可復甦當時離心（1000rpm 5min左右）後,以免中和後加入的消化液,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落.在無菌臺內將完全培養基加入培養瓶內,然後繼續進行傳代、傳代培養首先進行細胞復甦,使細胞基本成單個懸浮,然後用無菌吸管從凍存管內取出細胞細胞培養首先分為原代培養和傳代培養、凍存,取出凍存的細胞迅速放入後交細胞面浸至水面以下不斷搖動至融化,晃動使消化液鋪均勻置37度培養箱約2分鐘,24h後換液.貼壁細胞.6ml,加入完全培養基繼續培養、原代培養需要從組織中消化,去除血清和死細胞,輕輕吹勻後.懸浮細胞,加入完全培養基後繼續培養或實驗: 對於貼壁細胞應先吸(倒)盡培養基,加入2-3ml完全培養基後,適時換液,按此比例進行消化.PBS清洗2-3次,使強度減弱,使細胞均勻後置培養箱內培養: 1,5min左右）後加入完全培養基,完全培養基重懸培養. 2.先將水溫鍋調至37-38度.應遵守慢凍快融的原則；二、純化出單細胞、分離. 細胞傳代: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養瓶內,分置其它培養瓶內加入完全培養基繼續培養