到了交配季節，雌蛇常會發出一種特有的氣味，這是由於它面板和尾基部腺體的分泌物所致。有的氣味相當強烈，人亦能聞出來。雄蛇便是依靠敏銳的嗅覺而找到同類的雌蛇的。有的蛇有叢集過冬的習性，這樣在出蟄時，兩性相遇的機會就較多，往往在越冬場所的附近就進行交配，然後才分散活動。

有些蛇在交配前有求偶的表現。那些頭部腹面兩側具有疣粒的雄蛇，在求偶時就用疣粒去撫摩雌體，王蛇的雄蛇則用殘留的後肢去搔抓雌蛇，引起雌蛇的性感，抓的聲音甚至在幾尺遠的地方都可以聽見。浙江短尾峻的雄蛇在發現雌蛇時，就在後面緊追，頻頻伸出舌頭，去嗅雌蛇的尾基部，並且不停地抖動尾部，一有機會，便衝到雌蛇的背上，或緊挨其一側。

然後，雌雄兩蛇後半身繞在一起，進行交配。這時雌蛇的尾部翹起，劇烈抖動，交配時間僅為2～6分鐘。蛇島的中介蝮在交配前，雄蛇頻頻點頭，向雌蛇頭部接近，雌蛇頭部微微抬起，並點頭，交配約18分鐘，之後雄蛇尾部下垂，交接處脫開。

蛇交配時間的長短，差別頗大，一般只有幾分鐘，但亦有很長的。

成都動物園飼養的黑眉錦蛇，在1965年4月初發生一次交配，從上午8時繼續到下午7時，交配時間為11小時。我們在1975年5月17日，也觀察到蛇籠裡的一對黑眉錦蛇在交配，從午後3時半到第二天凌晨4時半才交配完畢，長達13小時之久。當時氣溫為21～24℃，相對溼度為78％～93％。

交配時，雄蛇尾部擺動不停，發出聲音來。交配時間還有更長的，例如紅點錦蛇，可長達20小時以上。

雌蛇的交接器為洩殖肛腔，雄蛇的交接器是一對袋狀的結構叫做半陰莖，位於尾基內部，袋的內壁上有許多小棘，棘的大小和數量因蛇的種類而有不同，半陰莖的形狀亦有種的差異。

交配時，袋的內面向外翻出體外，插入雌體的洩殖肛腔內，進行體內受精，但每次交配只使用一側的半陰莖。在繁殖季節內，一條雄蛇可和幾條雌蛇交配，但雌蛇只交配一次，因此，養蛇場裡常常讓一條雄蛇配上幾條雌蛇進行繁殖。例如銀環蛇大致10條雌蛇配上2～3條雄蛇就夠了。

交配後，精子可在雌蛇輸卵管內長期生存，一對浙江短尾蝮交配一次，雌蛇連續產仔3年，第一年產仔7條，第二年產仔4條，第三年產仔14條。有的蛇，其精子可在雌體內生存5年之久。

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春天萬物復甦，是蛇交配的高峰期。每年到了蛇的繁殖期，達到性成熟的雌蛇面板和尾基部嗅腺會分泌物質並釋放出大量的氣味，這種濃烈的氣味會吸引雄蛇。雄蛇會更加頻繁地吐舌，順著氣味發出的地方前去尋偶。雌雄兩蛇相遇後，會一前一後追逐片刻，然後身體慢慢接近、相互用身體磨蹭對方。雄蛇尤其喜歡嗅雌蛇尾端的洩殖孔，該處有深褐色的黏性物質滲出，這對吸引雄蛇作用極大。

處於發情期的雌雄兩蛇嬉戲片刻後，先是雄蛇伏於雌蛇背部，然後兩蛇的尾巴逐漸靠近並纏繞交配在一起，給人一種擰麻花般的感覺，這就是交配中兩蛇的形態。發情期強行求偶的不在少數，多是雄蛇用嘴咬住雌蛇身體的上部，達到固定作用後，隨後進行交配（彩圖34）。

蛇交配時間長短不一，短則幾分鐘或幾十分鐘，長則幾小時或24小時以上。蛇逐偶交配前，“爭風吃醋”是在所難免的，發情期蛇園這樣的鏡頭比比皆是（彩圖35、彩圖36）。