標本的選擇應根據感染部位而異,可取痰、支氣管灌洗液、尿、糞、腦脊液或胸腔積液、腹腔積液、分泌液或組織細胞。結核患者各感染部位的標本中大多數混有其他細菌,因此,必須採取適宜的方法抑制汙染菌。
痰收集最好是患者清晨的第一口痰,置於清潔乾燥無菌的玻璃瓶內送檢。尿液收集應取晨尿送檢,必要時作無菌導尿送檢,診斷泌尿道結核通常需3~5份標本。胃液採集可於空腹時抽取,置無菌管中送檢。腦脊液、胸腔積液、腹腔積液及關節液等需無菌抽取並置於無菌試管中送檢。
腦脊液標本靜置後,表面可有細薄凝塊,取凝塊作塗片或接種培養。採集膿液時應直接從潰瘍處取膿汁或分泌物。深部膿腫用無菌注射器抽取,置無菌試管中送檢。棉拭子採集的標本應直接放置在肉湯中培養。
形態學檢查方法:
(1)直接塗片染色鏡檢:用接種環取患者痰液中濃厚部分或離心沉澱的尿沉澱物2~3接種環塗片,作厚塗片進行齊-尼抗酸染色。為提高鏡檢敏感性,也可用金胺“O”染色,在熒光顯微鏡下結核分枝桿菌呈現金黃色熒光。
鏡檢時應仔細查遍整個塗片或觀察至少100個視野。結核分枝桿菌抗酸染色後呈紅色,其他細菌和細胞為藍色。經免疫熒光染色的結核分枝桿菌,在黑色背景中呈亮黃色。塗片鏡檢結果應報告“找到抗酸桿菌或未找到抗酸桿菌”。
擴充套件資料:
結核分枝桿菌的培養特性:
結核分枝桿菌專性需氧。最適溫度為37℃,低於30℃不生長。結核分枝桿菌細胞壁的脂質含量較高,影響營養物質的吸收,故生長緩慢。在一般培養基中每分裂1代需時18~24小時,營養豐富時只需5小時。
初次分離需要營養豐富的培養基。常用的有羅氏(Lowenstein-Jensen)固體培養基,內含蛋黃、甘油、馬鈴薯、無機鹽和孔雀綠等。孔雀綠可抑制雜菌生長,便於分離和長期培養。蛋黃含脂質生長因子,能刺激生長。
根據接種菌多少,一般2~4周可見菌落生長。菌落呈顆粒、結節或花菜狀,乳白色或米黃色,不透明。在液體培養基中可能由於接觸營養面大,細菌生長較為迅速。一般1~2周即可生長。臨床標本檢查液體培養比固體培養的陽性率高數倍。
標本的選擇應根據感染部位而異,可取痰、支氣管灌洗液、尿、糞、腦脊液或胸腔積液、腹腔積液、分泌液或組織細胞。結核患者各感染部位的標本中大多數混有其他細菌,因此,必須採取適宜的方法抑制汙染菌。
痰收集最好是患者清晨的第一口痰,置於清潔乾燥無菌的玻璃瓶內送檢。尿液收集應取晨尿送檢,必要時作無菌導尿送檢,診斷泌尿道結核通常需3~5份標本。胃液採集可於空腹時抽取,置無菌管中送檢。腦脊液、胸腔積液、腹腔積液及關節液等需無菌抽取並置於無菌試管中送檢。
腦脊液標本靜置後,表面可有細薄凝塊,取凝塊作塗片或接種培養。採集膿液時應直接從潰瘍處取膿汁或分泌物。深部膿腫用無菌注射器抽取,置無菌試管中送檢。棉拭子採集的標本應直接放置在肉湯中培養。
形態學檢查方法:
(1)直接塗片染色鏡檢:用接種環取患者痰液中濃厚部分或離心沉澱的尿沉澱物2~3接種環塗片,作厚塗片進行齊-尼抗酸染色。為提高鏡檢敏感性,也可用金胺“O”染色,在熒光顯微鏡下結核分枝桿菌呈現金黃色熒光。
鏡檢時應仔細查遍整個塗片或觀察至少100個視野。結核分枝桿菌抗酸染色後呈紅色,其他細菌和細胞為藍色。經免疫熒光染色的結核分枝桿菌,在黑色背景中呈亮黃色。塗片鏡檢結果應報告“找到抗酸桿菌或未找到抗酸桿菌”。
擴充套件資料:
結核分枝桿菌的培養特性:
結核分枝桿菌專性需氧。最適溫度為37℃,低於30℃不生長。結核分枝桿菌細胞壁的脂質含量較高,影響營養物質的吸收,故生長緩慢。在一般培養基中每分裂1代需時18~24小時,營養豐富時只需5小時。
初次分離需要營養豐富的培養基。常用的有羅氏(Lowenstein-Jensen)固體培養基,內含蛋黃、甘油、馬鈴薯、無機鹽和孔雀綠等。孔雀綠可抑制雜菌生長,便於分離和長期培養。蛋黃含脂質生長因子,能刺激生長。
根據接種菌多少,一般2~4周可見菌落生長。菌落呈顆粒、結節或花菜狀,乳白色或米黃色,不透明。在液體培養基中可能由於接觸營養面大,細菌生長較為迅速。一般1~2周即可生長。臨床標本檢查液體培養比固體培養的陽性率高數倍。