1、非條件反射是透過遺傳獲得的， 生來就有的， 而條件反射是後天形成的。

2、非條件反射是具體事物 （食物、 針扎等）刺激引起的， 而條件反射是由訊號刺激引起的。訊號刺激分成具體訊號和抽象訊號， 具體訊號如： 聲音、 外形、 顏色、 氣味等， 抽象訊號指語言、 文字。

3、非條件反射由較低階的神經中樞（如腦幹、 脊髓） 參與即可完成， 而條件反射必須由高階神經中樞大腦皮層的參與才能完成。

4、非條件反射是終生的， 固定的，不會消退， 而條件反射是暫時的， 可以消退。

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1、條件反射的實驗

為了計量狗在實驗期間分泌唾液的量，他為每一隻實驗的狗做了一個小手術，即改變了一條唾腺導管的路線，唾液通常是透過一條唾腺經過導管流入狗的口腔的，巴甫洛夫改變了這條導管的線路，使它通到體外。這樣，就可以接取和計量由導管滴出的唾液。

待狗的手術口癒合後，巴甫洛夫便開始實驗，他每次給狗吃肉的時候，狗即流口水，而且看到肉就流口水，這說明狗是健康的，具有流涎反應。

此後，巴甫洛夫每次給狗吃肉之前總是按蜂鳴器。於是，這聲音就如同讓狗看到肉一樣，也會使他們流下口水，即使蜂鳴器響過後沒有食物，亦如此。不過，巴甫洛夫發現，他不能無休止的連續欺騙這些狗。

如果蜂鳴器響過後不給食物，狗對該聲音的反應就會愈來愈弱，分泌的唾液一次比一次少。但是，假如不是連續數天的試驗，他們還會對蜂鳴器的聲音作出流涎的反應，然而已經不像先前得那麼多了。

條件反射與非條件反射最主要的區別在於，條件反射是由於條件刺激引起的反射，一般建立在非條件反射的基礎上；而非條件反射是與生俱來的，恆久不變的，是生物的基本生存能力。

就像著名的巴甫洛夫關於反射的實驗，狗吃東西時分泌唾液是非條件反射，而聽到鈴鐺分泌唾液是條件反射，是長期的強化（無關刺激和非條件刺激在時間上的結合）所得。條件反射要經過大腦皮層，而非條件反射一般只經過大腦皮層以下的中樞，較低階。

動物先天的反射，稱為非條件反射。它是相對於條件反射而言的。在對條件反射的研究中，作為應該與條件刺激相結合的非條件反射常常應用食物性反射（唾液或胃液的分泌）。

二、非條件反射的例子

非條件反射的常見例項：小孩子一打針就哭、 吃楊梅時分泌唾液、 膝跳反射、 縮手反射、 眨眼反射、 嬰兒的吮吸反射等。