TCR,Ig基因重排檢測 專案簡介: 淋巴瘤是一種起源於淋巴結或者其他淋巴組織的惡性腫瘤，組織學上可見淋巴細胞和/或組織細胞的腫瘤性增生，淋巴惡性腫瘤的臨床診斷，主要以組織形態學或者細胞形態學，結合免疫組化或者流式細胞計數免疫表型分型為主，能確診大約90%-95%的病例，但仍有5%-10%的病例僅憑上述方法不能確診。近年來，國外分子生物學技術證實，細胞的克隆形成能力(clonality)可協助腫瘤的診斷。淋巴瘤都存在克隆性增殖（腫瘤性增生）的淋巴細胞，在同一病人體內不論組織型別和病理分期，都表現為相同的克隆性淋巴細胞群。 淋巴細胞的基本特徵之一，即B細胞中Ig基因和T細胞中的TCR基因的重排。基因重排指的是不同的淋巴細胞的Ig或者TCR片段在細胞分化過程中發生的重新排列組合。正常淋巴細胞未受任何刺激情況下，其基因重排是隨機的，細胞表現為多家族和多克隆性，具有發揮各種細胞免疫作用的潛能。而在淋巴瘤發生過程中，在腫瘤特異性抗體或腫瘤相關抗原刺激下，淋巴細胞某一個或幾個TCR或Ig基因家族會發生針對性和選擇性重排，導致TCR或Ig基因單克隆性表達，使淋巴細胞呈現為克隆性增殖，導致在淋巴結，外周血或者骨髓細胞中出現1個或2個主要淋巴細胞克隆，為單克隆性。TCR和Ig基因家族的單克隆重排是淋巴瘤細胞群的重要特徵，用於輔助診斷淋巴瘤。 Ig和TCR各自包含有眾多的基因家族，每個家族都具有不同的基因片段，Ig家族包括有IgH，IgK和IgL，TCR基因家族包括有TCRG, TCRB, TCRA和TCRD，臨床檢測主要以檢測B淋巴細胞的IgH以及T淋巴細胞的TCRG。IgH重排檢測大約能檢出91%的B系淋巴瘤，TCRG基因結構簡單，只需要很少的PCR反應就能檢測出全部可能的重排。在B細胞檢測中增加IgK及T細胞檢測中增加TCRB和TCRD的檢測可以大大提高陽性檢出率，減少假陰性率。我們建議同時檢測。而IgL,TCRA克隆性重排檢出率低，且重排型別有限，故臨床重排意義不大。PCR擴增法具備簡便，經濟，省時，敏感，高效，易自動化，能用於FFPE標本檢測等優點，因而廣泛適用於臨床診斷和科研。 檢測方法： 從蠟塊或者血液標本中提取基因組DNA，以PCR擴增法分析基因有無單克隆重排。 樣本採集及送檢要求 樣本採集： 10%中性福爾馬林固定的石蠟包埋蠟塊或8-10片5-10μm切片； 5-10ml EDTA抗凝的外周血或骨髓血。 樣本儲存及穩定性： FFPE標本：室溫運輸； 血液標本：2-8℃冷藏運輸，取樣後儘快送檢（72小時至實驗室佳）不可冷凍。 樣本拒收標準： FFPE標本：非10%中性福爾馬林固定的；盛樣本容器和/或檢驗申請單上資訊缺失或不符； 血液標本：盛樣本容器和/或檢驗申請單上資訊缺失或不符； 未使用合適的抗凝劑； 送檢樣本容器破損，有滲漏或者選擇不當； 出現溶血，嚴重凝血等情況的； 冷凍樣本。 臨床意義： 用於輔助診斷淋巴瘤與反應性增生； 用於鑑定淋巴瘤細胞譜系； 用於監測淋巴瘤患者治療情況。
TCR,Ig基因重排檢測 專案簡介: 淋巴瘤是一種起源於淋巴結或者其他淋巴組織的惡性腫瘤，組織學上可見淋巴細胞和/或組織細胞的腫瘤性增生，淋巴惡性腫瘤的臨床診斷，主要以組織形態學或者細胞形態學，結合免疫組化或者流式細胞計數免疫表型分型為主，能確診大約90%-95%的病例，但仍有5%-10%的病例僅憑上述方法不能確診。近年來，國外分子生物學技術證實，細胞的克隆形成能力(clonality)可協助腫瘤的診斷。淋巴瘤都存在克隆性增殖（腫瘤性增生）的淋巴細胞，在同一病人體內不論組織型別和病理分期，都表現為相同的克隆性淋巴細胞群。 淋巴細胞的基本特徵之一，即B細胞中Ig基因和T細胞中的TCR基因的重排。基因重排指的是不同的淋巴細胞的Ig或者TCR片段在細胞分化過程中發生的重新排列組合。正常淋巴細胞未受任何刺激情況下，其基因重排是隨機的，細胞表現為多家族和多克隆性，具有發揮各種細胞免疫作用的潛能。而在淋巴瘤發生過程中，在腫瘤特異性抗體或腫瘤相關抗原刺激下，淋巴細胞某一個或幾個TCR或Ig基因家族會發生針對性和選擇性重排，導致TCR或Ig基因單克隆性表達，使淋巴細胞呈現為克隆性增殖，導致在淋巴結，外周血或者骨髓細胞中出現1個或2個主要淋巴細胞克隆，為單克隆性。TCR和Ig基因家族的單克隆重排是淋巴瘤細胞群的重要特徵，用於輔助診斷淋巴瘤。 Ig和TCR各自包含有眾多的基因家族，每個家族都具有不同的基因片段，Ig家族包括有IgH，IgK和IgL，TCR基因家族包括有TCRG, TCRB, TCRA和TCRD，臨床檢測主要以檢測B淋巴細胞的IgH以及T淋巴細胞的TCRG。IgH重排檢測大約能檢出91%的B系淋巴瘤，TCRG基因結構簡單，只需要很少的PCR反應就能檢測出全部可能的重排。在B細胞檢測中增加IgK及T細胞檢測中增加TCRB和TCRD的檢測可以大大提高陽性檢出率，減少假陰性率。我們建議同時檢測。而IgL,TCRA克隆性重排檢出率低，且重排型別有限，故臨床重排意義不大。PCR擴增法具備簡便，經濟，省時，敏感，高效，易自動化，能用於FFPE標本檢測等優點，因而廣泛適用於臨床診斷和科研。 檢測方法： 從蠟塊或者血液標本中提取基因組DNA，以PCR擴增法分析基因有無單克隆重排。 樣本採集及送檢要求 樣本採集： 10%中性福爾馬林固定的石蠟包埋蠟塊或8-10片5-10μm切片； 5-10ml EDTA抗凝的外周血或骨髓血。 樣本儲存及穩定性： FFPE標本：室溫運輸； 血液標本：2-8℃冷藏運輸，取樣後儘快送檢（72小時至實驗室佳）不可冷凍。 樣本拒收標準： FFPE標本：非10%中性福爾馬林固定的；盛樣本容器和/或檢驗申請單上資訊缺失或不符； 血液標本：盛樣本容器和/或檢驗申請單上資訊缺失或不符； 未使用合適的抗凝劑； 送檢樣本容器破損，有滲漏或者選擇不當； 出現溶血，嚴重凝血等情況的； 冷凍樣本。 臨床意義： 用於輔助診斷淋巴瘤與反應性增生； 用於鑑定淋巴瘤細胞譜系； 用於監測淋巴瘤患者治療情況。