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1 # 鄒哥哥
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2 # hhh哈哈哈哈哈
1、作用不同:斐林試劑是新配製的溶液,它在加熱條件下與醛基反應,被還原成磚紅色的沉澱,可用於鑑定可溶性還原糖的存在。用斐林試劑鑑定可溶性還原糖時,溶液的顏色變化過程為:淺藍色→棕色→磚紅色(沉澱)。
鑑定生物組織中是否含有蛋白質時,常用雙縮脲法,使用的是雙縮脲試劑,發生的是雙縮脲反應。雙縮脲反應實質是在鹼性環境下的與雙縮脲試劑發生的紫色反應。而蛋白質分子中含有很多與雙縮脲結構相似的肽鍵,所以蛋白質都能與雙縮脲試劑發生顏色反應。
2、配置方法不同:
斐林試劑配製方法:0.1 g/mI NaOH(甲液)和0.05 g/mI CuSO4(乙液)。甲液配製方法是將50 g氫氧化鈉和137 g酒石酸鉀鈉溶於500 mI蒸餾水中(貯於帶橡皮塞的瓶中)。乙液配製方法是將34.5 g結晶硫酸銅溶於500 ml水中,加0.5 mI硫酸。混合均勻。
雙縮脲試劑A是質量分數為0.1 g/mL的NaOH水溶液;雙縮脲試劑B是質量分數為0.01 g/mL的CuSO4水溶液.先在待測液中加入雙縮脲試劑A 3mL,振盪均勻(營造鹼性環境),再加入1~2滴雙縮脲試劑B,振盪均勻。
3、使用方法不同:
斐林試劑使用時,先反溶液和溶液混合(將滴溶液滴入溶液中),而後立即使用。
雙縮脲試劑使用時,先加入溶液(2mL),振盪搖勻,造成鹼性的反應環境,然後再加入3~4滴溶液,振盪搖勻後觀察現象。
檢驗還原性糖用斐林試劑,檢驗蛋白質用雙縮脲試劑。
區別:
(1)溶液濃度不一樣
斐林試劑的濃度事0.1mol/LNaOH+0.05mol/LCuSO4;雙縮脲試劑的濃度是0.1mol/LNaOH+0.01mol/LCuSO4
(2)使用原理不一樣
斐林試劑在加熱條件下與醛基反應,被還原成磚紅色的沉澱,用來鑑定可溶性還原糖的存在,它是新配製的溶液。用斐林試劑鑑定可溶性還原糖時,溶液的顏色變化會從淺藍色到棕色再到磚紅色。我們常用雙縮脲法來鑑定生物組織中是否含有蛋白質,用的是雙縮脲試劑,會發生雙縮脲反應。在鹼性環境下的與雙縮脲試劑發生的紫色反應是雙縮脲反應的實質。由於蛋白質分子中有著和雙縮脲試劑結構相似的肽鍵,蛋白質與雙縮脲試劑發生顏色反應,因此,雙縮脲試劑可以用來鑑定蛋白質的存在。
(3)使用方法不一樣
使用斐林試劑的時候,先把滴溶液滴入溶液中,一定要立即使用;使用雙縮脲試劑的時候,先把2mL溶液振盪搖勻,形成鹼性的反應環境,最後加入三到四滴溶液,搖勻之後觀察現象。