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  • 1 # 藍風24

    複製數計算公式:copies/ml(複製數)=(6.02 x 10(23)次複製數/摩爾) x (濃度) / (MW g/mol)。

    細菌細胞中,某種特定質粒的數目。根據複製特性,質粒分嚴緊型和鬆弛型兩類,前者在細胞中只含1~2個,而後者含10~15個以上。

    恆定的複製數與質粒複製控制系統、宿主細胞遺傳背景及生長條件有關。

    質粒複製控制系統首先透過調節複製的起始點來控制複製數,調節因素包括阻遏蛋白、反義RNA和某些順向重複序列。

    有些質粒還有其他控制系統,如有分配功能的par系統和確保質粒穩定遺傳的ccd系統。一旦質粒上與調控有關的基因或位點突變,可使複製數明顯增加或減少。

    擴充套件資料

    實時熒光定量PCR其定量的基本原理是在 PCR 反應體系中加入非特異性的熒光染料(如: SYBR GREEN I )或特異性的熒光探針(如: Taqman 探針)。

    實時檢測熒光量的變化,獲得不同樣品達到一定的熒光訊號(閾值)時所需的迴圈次數: CT 值( Cycle Threshold );透過將已知濃度標準品的 CT 值與其濃度的對數繪製標準曲線,就可以準確定量樣品的濃度。

    熒光定量 PCR 技術具有簡便、快捷的優點,能夠有效擴增低複製的靶片段 DNA ,對每克樣品中 20pg-10ng 的轉基因成分進行有效檢測。

    同時,與 Southern 法相比,熒光定量 PCR 技術可對 T-DNA 的不同序列進行擴增,因此能實現對轉基因品系中的基因重組的檢測( Giovanna 2002 )。

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