[原理]
植物組織中的丙二醛(MDA) 在酸性條件下加熱可與硫代巴比妥酸(TBA) 產生顯色反應，反應產物為粉紅色的3，5，5一三甲基惡唑2，4一二酮(Trimet—nine)。該物質在539nm波長下有吸收峰。由於硫代巴比妥酸也可與其它物質反應，並在該波長處有吸收，為消除硫代巴比妥酸與其它物質反應的影響，在丙二醛含量測定時，同時測定600nm下的吸光度，利用539nm與600nm下的吸光度的差值計算丙二醛的含量。
植物組織丙二醛含量測定
植物葉片在衰老過程中發生一系列生理生化變化，如核酸和蛋白質含量下降、葉綠素降解、光合作用降低及內源激素平衡失調等。這些指標在一定程度上反映衰老過程的變化。近來大量研究表明，植物在逆境脅迫或衰老過程中，細胞內活性氧代謝的平衡被破壞而有利於活性氧的積累。活性氧積累的危害之一是引發或加劇膜脂過氧化作用，造成細胞膜系統的損傷，嚴重時會導致植物細胞死亡。活性氧包括含氧自由基。自由基是具有未配對價電子的原子或原子團。生物體內產生的活性氧主要有超氧自由基(O-2)、羥自由基(OH·)、過氧自由基(ROO·)、烷氧自由基(RO·)、過氧化氫（H2O2）、單線態氧（O21）等。植物對活性氧產生有酶促和非酶促兩類防禦系統，超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)、過氧化物酶POD和抗壞血酸過氧化物酶(ASA—POD)等是酶促防禦系統的重要保護酶，抗壞血酸(ASA)和還原型谷胱甘肽(GSH)等是非酶促防禦系統中的重要抗氧化劑。
丙二醛(MDA)是細胞膜脂過氧化作用的產物之一，它的產生還能加劇膜的損傷。因此，丙二醛產生數量的多少能夠代表膜脂過氧化的程度，也可間接反映植物組織的抗氧化能力的強弱。所以在植物衰老生理和抗性生理研究中，丙二醛含量是一個常用指標。
[材料、儀器、藥品]
1．材料：植物抗逆性鑑定實驗中的四種菠菜樣品，即綠色和黃色葉片的高溫處理和室溫對照。
2．儀器：(1) 分光光度計；(2) 離心機；（3）水浴鍋：(4) 天平；(5) 研缽；(6) 剪刀；(7) 5ml刻度離心管；(9) 刻度試管(10ml)；(10) 鑷子；(11) 移液管(5ml、2ml、1ml)；（12）冰箱。
3．藥品：(1) 0.05mol/L pH7.8磷酸鈉緩衝液；(2) 石英砂；(3) 5％三氯乙酸溶液：稱取5g三氯乙酸，先用少量蒸餾水溶解，然後定容到100ml；(4) 0.5％硫代巴比妥酸溶液：稱取0.5g硫代巴比妥酸，用5％三氯乙酸溶解，定容至100ml，即為0.5％硫代巴比妥酸的5％三氯乙酸溶液。
[方法]
1．丙二醛的提取：取0.5g樣品，加入2ml預冷的0.05mol/L pH7.8的磷酸緩衝液，加入少量石英砂，在經過冰浴的研缽內研磨成勻漿，轉移到5ml刻度離心試管，將研缽用緩衝液洗淨，清洗也移入離心管中，最後用緩衝液定容至5ml。在4500轉/min離心10min。上清液即為丙二醛提取液。
2．丙二醛含量測定：吸取2 ml的提取液於刻度試管中，加入0.5％硫代巴比妥酸的5%三氯乙酸溶液3ml，於沸水浴上加熱10min，迅速冷卻。於4500轉/min離心10min。取上清液於532、600nm波長下，以蒸餾水為空白調透光率100%，測定吸光度。
3．結果計算：
(A532—A600) ×V1×V
1.55×10-1×W×V2
丙二醛含量（nmol/g）=
式中：A為吸光度；V1為反應液總量(5m1)；V為提取液總量(5ml)；V2為反應液中的提取液數量(2ml)；W為植物樣品重量(0.5g)；1.55×10-1為丙二醛的微摩爾吸光係數（在1升溶液中含有1祄ol丙二醛時的吸光度）。
4．注意事項：
(1) 0.1~0.5％的三氯乙酸對MDA—TBA反應較合適，若高於此濃度，其反應液的非專一性吸收偏高；
(2) MDA—TBA顯色反應的加熱時間，最好控制沸水浴10~15min之間。時間太短或太長均會引起532nm下的光吸收值下降；
(3) 如用MDA作為植物衰老指標，首先應檢驗被測試材料提取液是否能與TBA反應形成532nm處的吸收峰。否則只測定532、600nm兩處A值，計算結果與實際情況不符，測得的高A值是一個假象；
(4) 在有糖類物質干擾條件下(如深度衰老時)，吸光度的增大，不再是由於脂質過氧化產物MDA含量的升高，而是水溶性碳水化合物的增加，由此改變了提取液成分，不能再用532nm、600nm兩處A值計算MDA含量，可測定510、532、560nm處的A值，用A532一(A510—A560)/2的值來代表丙二醛與TBA反應液的吸光值。
[原理]
植物組織中的丙二醛(MDA) 在酸性條件下加熱可與硫代巴比妥酸(TBA) 產生顯色反應，反應產物為粉紅色的3，5，5一三甲基惡唑2，4一二酮(Trimet—nine)。該物質在539nm波長下有吸收峰。由於硫代巴比妥酸也可與其它物質反應，並在該波長處有吸收，為消除硫代巴比妥酸與其它物質反應的影響，在丙二醛含量測定時，同時測定600nm下的吸光度，利用539nm與600nm下的吸光度的差值計算丙二醛的含量。
植物組織丙二醛含量測定
植物葉片在衰老過程中發生一系列生理生化變化，如核酸和蛋白質含量下降、葉綠素降解、光合作用降低及內源激素平衡失調等。這些指標在一定程度上反映衰老過程的變化。近來大量研究表明，植物在逆境脅迫或衰老過程中，細胞內活性氧代謝的平衡被破壞而有利於活性氧的積累。活性氧積累的危害之一是引發或加劇膜脂過氧化作用，造成細胞膜系統的損傷，嚴重時會導致植物細胞死亡。活性氧包括含氧自由基。自由基是具有未配對價電子的原子或原子團。生物體內產生的活性氧主要有超氧自由基(O-2)、羥自由基(OH·)、過氧自由基(ROO·)、烷氧自由基(RO·)、過氧化氫（H2O2）、單線態氧（O21）等。植物對活性氧產生有酶促和非酶促兩類防禦系統，超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)、過氧化物酶POD和抗壞血酸過氧化物酶(ASA—POD)等是酶促防禦系統的重要保護酶，抗壞血酸(ASA)和還原型谷胱甘肽(GSH)等是非酶促防禦系統中的重要抗氧化劑。
丙二醛(MDA)是細胞膜脂過氧化作用的產物之一，它的產生還能加劇膜的損傷。因此，丙二醛產生數量的多少能夠代表膜脂過氧化的程度，也可間接反映植物組織的抗氧化能力的強弱。所以在植物衰老生理和抗性生理研究中，丙二醛含量是一個常用指標。
[材料、儀器、藥品]
1．材料：植物抗逆性鑑定實驗中的四種菠菜樣品，即綠色和黃色葉片的高溫處理和室溫對照。
2．儀器：(1) 分光光度計；(2) 離心機；（3）水浴鍋：(4) 天平；(5) 研缽；(6) 剪刀；(7) 5ml刻度離心管；(9) 刻度試管(10ml)；(10) 鑷子；(11) 移液管(5ml、2ml、1ml)；（12）冰箱。
3．藥品：(1) 0.05mol/L pH7.8磷酸鈉緩衝液；(2) 石英砂；(3) 5％三氯乙酸溶液：稱取5g三氯乙酸，先用少量蒸餾水溶解，然後定容到100ml；(4) 0.5％硫代巴比妥酸溶液：稱取0.5g硫代巴比妥酸，用5％三氯乙酸溶解，定容至100ml，即為0.5％硫代巴比妥酸的5％三氯乙酸溶液。
[方法]
1．丙二醛的提取：取0.5g樣品，加入2ml預冷的0.05mol/L pH7.8的磷酸緩衝液，加入少量石英砂，在經過冰浴的研缽內研磨成勻漿，轉移到5ml刻度離心試管，將研缽用緩衝液洗淨，清洗也移入離心管中，最後用緩衝液定容至5ml。在4500轉/min離心10min。上清液即為丙二醛提取液。
2．丙二醛含量測定：吸取2 ml的提取液於刻度試管中，加入0.5％硫代巴比妥酸的5%三氯乙酸溶液3ml，於沸水浴上加熱10min，迅速冷卻。於4500轉/min離心10min。取上清液於532、600nm波長下，以蒸餾水為空白調透光率100%，測定吸光度。
3．結果計算：
(A532—A600) ×V1×V
1.55×10-1×W×V2
丙二醛含量（nmol/g）=
式中：A為吸光度；V1為反應液總量(5m1)；V為提取液總量(5ml)；V2為反應液中的提取液數量(2ml)；W為植物樣品重量(0.5g)；1.55×10-1為丙二醛的微摩爾吸光係數（在1升溶液中含有1祄ol丙二醛時的吸光度）。
4．注意事項：
(1) 0.1~0.5％的三氯乙酸對MDA—TBA反應較合適，若高於此濃度，其反應液的非專一性吸收偏高；
(2) MDA—TBA顯色反應的加熱時間，最好控制沸水浴10~15min之間。時間太短或太長均會引起532nm下的光吸收值下降；
(3) 如用MDA作為植物衰老指標，首先應檢驗被測試材料提取液是否能與TBA反應形成532nm處的吸收峰。否則只測定532、600nm兩處A值，計算結果與實際情況不符，測得的高A值是一個假象；
(4) 在有糖類物質干擾條件下(如深度衰老時)，吸光度的增大，不再是由於脂質過氧化產物MDA含量的升高，而是水溶性碳水化合物的增加，由此改變了提取液成分，不能再用532nm、600nm兩處A值計算MDA含量，可測定510、532、560nm處的A值，用A532一(A510—A560)/2的值來代表丙二醛與TBA反應液的吸光值。