一般來說K562是很好養的一個細胞，我養的時候一般三天傳一次，傳代比例為1：6左右，培養條件為IMDM培養基加10%FBS，另外加1%的NEAA和雙抗，後二者可加可不加。正常狀態下會有小部分細胞會貼在皿底，低密度下會有結團情況，但是團不會太大；高密度的時候大部分是單個細胞。 對狀態不太好的懸浮細胞來說，首先應該保證細胞的密度，如果密度太小的話狀態會不好，一個10cm皿我一般接種10的6次方的細胞。其次是要“靜養”，儘量減少離心的次數，每兩到三天補充少量培養基，死細胞較少就不用離心，如果培養基過多的話，靜置一會兒，細胞沉澱下去之後吸去一部分上清再補一些培養基，一個10cm皿可以裝大約20mL的培養基。最後就是注意一下是否有汙染的情況，特別是支原體汙染，支原體汙染有的時候不會使細胞死亡，但是會影響細胞的狀態，一般表現為背景中會有很多細胞碎片，有條件可以考慮做一個支原體檢測。 最後關於凍存的問題，按照ATCC上推薦的條件就可以了，這個凍存條件用10cm皿復甦的時候可以不離心的。最重要的是要保證梯度降溫，凍存盒在使用的時候溫度不能過低，必須是4度以上，異丙醇不要凍融太多次，然後轉移到液氮的時候要迅速，不要在室溫放置太久，這些就不用我多說了。最後，如果細胞狀態不好，凍存的時候一定要保證細胞數目，一皿最多凍兩支，否則細胞很難恢復狀態。懸浮細胞復甦之後一般要兩三天的時間才能看出來狀態好不好，在這幾天裡，凍存的時候損傷的細胞會逐漸死掉。如果復甦之後一兩天細胞狀態慢慢變差，可以考慮凍存是否出了問題。 以上都是我個人的經驗，希望有幫助。
一般來說K562是很好養的一個細胞，我養的時候一般三天傳一次，傳代比例為1：6左右，培養條件為IMDM培養基加10%FBS，另外加1%的NEAA和雙抗，後二者可加可不加。正常狀態下會有小部分細胞會貼在皿底，低密度下會有結團情況，但是團不會太大；高密度的時候大部分是單個細胞。 對狀態不太好的懸浮細胞來說，首先應該保證細胞的密度，如果密度太小的話狀態會不好，一個10cm皿我一般接種10的6次方的細胞。其次是要“靜養”，儘量減少離心的次數，每兩到三天補充少量培養基，死細胞較少就不用離心，如果培養基過多的話，靜置一會兒，細胞沉澱下去之後吸去一部分上清再補一些培養基，一個10cm皿可以裝大約20mL的培養基。最後就是注意一下是否有汙染的情況，特別是支原體汙染，支原體汙染有的時候不會使細胞死亡，但是會影響細胞的狀態，一般表現為背景中會有很多細胞碎片，有條件可以考慮做一個支原體檢測。 最後關於凍存的問題，按照ATCC上推薦的條件就可以了，這個凍存條件用10cm皿復甦的時候可以不離心的。最重要的是要保證梯度降溫，凍存盒在使用的時候溫度不能過低，必須是4度以上，異丙醇不要凍融太多次，然後轉移到液氮的時候要迅速，不要在室溫放置太久，這些就不用我多說了。最後，如果細胞狀態不好，凍存的時候一定要保證細胞數目，一皿最多凍兩支，否則細胞很難恢復狀態。懸浮細胞復甦之後一般要兩三天的時間才能看出來狀態好不好，在這幾天裡，凍存的時候損傷的細胞會逐漸死掉。如果復甦之後一兩天細胞狀態慢慢變差，可以考慮凍存是否出了問題。 以上都是我個人的經驗，希望有幫助。