細胞培養中常見的汙染情況總結如下:1、細菌：細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀，根據感染細菌的不同，可有不同的外形，培養液一般會渾濁變黃，對細胞生長影響明顯。仔細檢查一下器皿的滅菌情況，是否在高壓滅菌時放氣時間足夠，壓力足夠！尤其是和儲存培養液接觸的移液管等物品，連續兩次汙染的話有可能造成儲存液汙染，一定要注意！下次使用前檢查一下培養液是否存在渾濁的現象！可在培養液中加相應的抗生素處理2、黴菌：培養液是清亮的，倒置顯微鏡下無雜質，37度孵箱培養2-3天，仍清亮，但出現絮狀雜質，鏡下可見呈細絲狀的團狀漂浮物，可看到明顯的菌絲，細胞仍可生長，但時間長之後，細胞的活力狀態變差，用硫酸銅溶液擦拭CO2孵箱內，再把水盤裡也加上飽和量的硫酸銅。或者在培養箱的托盤加入飽和的消毒磷酸氫二鈉高鹽液體,可以防止黴菌汙染。CO2孵箱被黴菌汙染後，可把所有細胞暫時轉移，採用過氧乙酸擦洗孵箱（包括隔板，箱壁）。並把過氧乙酸放置在孵箱內一個小時，使其蒸汽瀰漫。待過氧乙酸的氣味消散後，再移入細胞。孵箱應定期清潔（2月左右），尤其在多雨的季節。其它培養箱清洗方法是：用84液擦洗－清水擦洗－75%酒精擦洗－紫外燈照。預防黴菌汙染，可在培養基里加3u/ml的兩性黴素或制黴菌素或放線菌素D或雙抗；但細胞一旦汙染，很難挽救，制黴菌素或放線菌素D或雙抗都於事無補，建議捨棄該汙染細胞。，將環境徹底消毒，如果所有細胞都汙染，可能是系統汙染，檢查一下培養基和器材，如果只是個別汙染，可能是操作問題，就要注意操作3、支原體：黑色的，好象多為多形，培養液一般培養液一般會渾濁，原體感染，國內血清很多都沒有做支原體陰性檢測，而支原體是牛血清中最常見的微生物之一。而且它不能用過濾的用泰樂菌素，獸用支原體病的藥，但可用於細胞培養，無任何不良反應。4、黑蛟蟲：可以穿透濾膜，也可以透過空氣傳播，低倍下為黑色點狀，高倍下可看見黑色的小蟲游來游去，培養液也是不渾的，一般不會太影響，細胞還是可以用的。常常是細胞生長狀態良好，且觀測到的運動物無明顯增多，且培養液顏色、透明度無明顯變化，可在同一批號的血清養的細胞中發現類似現象。對細胞生長狀態不會有明顯影響，在細胞增殖旺盛之後會自然消失，除更換血清外無須特殊處理。建議如果細胞有可能是此種汙染的話，可以增加細胞的種板密度，以提高細胞的生存率。5、真菌：一般培養液清亮，不變色，鏡下有絲狀物，有些真菌開始很像死細胞碎片，只是它很多很多的小塊很清楚，象珊瑚狀，不象細胞碎片分不清，慢慢的會長出很細的黑色絲狀物。真菌生長的比較慢，不象細菌那麼容易被發現，但是一旦發現有它的存在細胞就被汙染了，也很難救活了。6、原蟲：培養液可輕微渾濁，顯微鏡下那些細小的點狀物數量非常多，輕微活動，細胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢，而且細胞狀態不好，邊緣不清楚，細胞不透亮。他們與細胞可共生但會與細胞爭奪營養。這種共生是非常普遍的，但他們的數量小，細胞站優勢所以不會影響到細胞的正常生長，只有當他們到達一定的數量時就會影響到細胞的生長，最終形成惡性迴圈。汙染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環境問題等等關於培養基的無菌狀況，取培養基至培養瓶中（不加細胞），37度試培養一段時間後觀察。如果沒有細菌生長就是操作的問題。也可以在培養基中事先加入雙抗（硫酸鏈黴素和氨苄青黴素）。但雙抗有時會影響細胞的狀態，所以在做轉染、檢測細胞某項指標前一定要撤去雙抗，以避免影響實驗結果。1、孵箱應定期用三氧機消毒或者紫外光照射，並用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時孵箱內的水應是三蒸水2、超淨臺取材器材培養液培養瓶操作等因素3、超淨臺的風機不能過大，風機到6-8格。否則也可能能致黴菌汙染4、無菌室經甲醛燻蒸消毒後，可用同等量的氨水噴灑中和，約幾小時即可進入操作。