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1 # 我是阿嘛
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2 # 我是阿嘛
家兔急性瀰漫性血管內凝血
家兔瀰漫性血管內凝血
摘要：
方法：透過給家兔耳緣靜脈緩慢注射兔腦粉製作急性實驗性DIC動物模型，測定家兔注入兔腦粉前5分鐘、注入兔腦粉開始後10分鐘及40分鐘後3P實驗、纖維蛋白原定量和BPC的血液學實驗結果並比較。
結果：DIC前後血壓、呼吸頻率、血小板計數、3P試驗、纖維蛋白原定量。
結論：DIC為促凝物質大量入血引發凝血系統被啟用，凝血因子和血小板大量消耗，繼發纖溶系統啟用，進而發生出血綜合徵。
關鍵詞：瀰漫性血管內凝血;家兔DIC模型;血漿魚精蛋白副凝試驗;纖維蛋白原定量;血小板計數
前言：瀰漫性血管內凝血是指在某些致病因子作用下凝血因子或血小板被啟用，大量可溶性促凝物質入血，瀰漫性微血管內血栓形成，繼之因凝血因子及血小板被大量消耗及纖維蛋白溶解亢進而發生的出血綜合徵。臨床上，DIC患者主要表現為出血、休克、臟器功能障礙和貧血。
實驗室檢查是DIC診斷的一項重要依據，有確診意義的化驗能直接反映凝血酶或纖溶酶活性。 基於此，為了瞭解DIC的血液學變化和發病機制，初步瞭解檢查急性DIC的幾項血液學的常規方法，我組進行了本次實驗。
1. 實驗材料：
1.1 動物：健康、清潔家兔一隻（母，1.95kg，南方醫科大學實驗動物中心提供）
1.2 器材：電熱恆溫水浴箱，秒錶，小試管架，5ml試管×8，血細胞計數版，離心機，分光光度計，顯微鏡，注射器（1ml一支，5ml一支，10ml一支，50ml一支），加樣槍，2ml離心管×6，家兔手術檯，哺乳動物手術器械，手術線，紗布，粗剪，止血鉗，組織剪，眼科剪，眼科鑷，動脈夾。
1.3 藥品和試劑：4%兔腦粉生理鹽水浸液，1%硫酸魚精蛋白液，血小板稀釋液，20%烏拉坦，0.1%肝素生理鹽水，生理鹽水，飽和氯化鈉溶液。
1.4 儀器裝置：PcLab計算機生物訊號採集處理系統，壓力換能器，動靜脈插管，三通管
2. 測量指標：
2.1 凝血系統指標：血小板計數、纖維蛋白原定量
2.2 纖溶系統指標：魚精蛋白副凝試驗（3P試驗）
3. 實驗動物的製備方法及步驟：
3.1 動物麻醉固定備皮：挑選家兔，捉拿，稱量體重（Kg），按家兔體重計算麻醉量（20%烏拉坦5ml/kg），耳緣靜脈緩慢注射，待家兔四肢肌肉鬆弛，疼痛反射、角膜反射消失，呼吸平穩後，將其固定於手術檯上。用粗剪去除家兔頸部兔毛。
3.2 靜脈插管：沿家兔頸正中線切開面板，鈍性分離右側頸靜脈，穿雙線，閉夾近心端，結紮遠心端，剪開靜脈插入預先充滿生理鹽水的壓力換能器的導管。
3.3 動脈插管：鈍性分離出左頸總動脈，穿雙線，結紮遠心端，夾閉近心端，剪開動脈插入預先充滿生理鹽水並與PcLab資料採集系統透過壓力換能器相連的導管。 待各項指標穩定後，觀察並記錄正常血壓、呼吸。
3.4 取血樣本：用充有0.4ml 0.1%肝素生理鹽水的5ml注射器經頸總動脈取血3ml，分兩管，測定正常指標：3P試驗，纖維蛋白原定量，血小板計數。
3.5 複製DIC模型：經頸靜脈緩慢注射4%兔腦粉溶液（3ml/kg），注射速度為1~2ml/min。
3.6 15min後測定並記錄血壓、呼吸，採血測定3P試驗、纖維蛋白原、血小板計數並記
錄。
3.7 45min後重覆上述測量一次並記錄。
4. 試驗專案：
4.1 血小板計數(BPC)：吸血小板稀釋液0.38ml於一小試管內，用血紅蛋白吸管取血20
μl，立即加入血小板稀釋液內，充分搖勻後，用滴管將上述混懸液一小滴滴入計數板內，靜置5min後，用高倍鏡計數5箇中方格內血小板數，乘以1000，得每立方毫米血小板數。
4.2 血漿魚精蛋白副實驗(3P試驗)：取血漿0.4ml置於小試管內，加入1%硫酸魚精蛋白
液0。1ml，混勻，室溫下靜置30min，於觀察終點前，將試管輕輕搖動，有白色纖維或凝塊為陽性，均勻渾濁、無白色纖維為陰性。
4.3 纖維蛋白原定量（飽和鹽水法）：
4.3.1取血漿3ml置於試管中，加入飽和氯化鈉溶液2.7ml,充分混勻，置37℃水浴中
孵育3min
4.3.2以生理鹽水代替飽和氯化鈉溶液，進行同樣操作，作為對照管。
4.3.3以對照管調零，測出光密度（波長520mm）後，計算纖維蛋白原含量。
5. 實驗結果：
表1 DIC前後家兔各項指標的觀察與記錄
血壓
(mmHg)
150/130 正常狀態
DIC後15min 95/82
DIC後45min 65/46 呼吸頻率 (次/分) 57 66 80 血小板數量 （109/L） 160 86 60 纖維蛋白原定量 (g/L) 0.2 1.62
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家兔急性瀰漫性血管內凝血
家兔瀰漫性血管內凝血
摘要：
方法：透過給家兔耳緣靜脈緩慢注射兔腦粉製作急性實驗性DIC動物模型，測定家兔注入兔腦粉前5分鐘、注入兔腦粉開始後10分鐘及40分鐘後3P實驗、纖維蛋白原定量和BPC的血液學實驗結果並比較。
結果：DIC前後血壓、呼吸頻率、血小板計數、3P試驗、纖維蛋白原定量。
結論：DIC為促凝物質大量入血引發凝血系統被啟用，凝血因子和血小板大量消耗，繼發纖溶系統啟用，進而發生出血綜合徵。
關鍵詞：瀰漫性血管內凝血;家兔DIC模型;血漿魚精蛋白副凝試驗;纖維蛋白原定量;血小板計數
前言：瀰漫性血管內凝血是指在某些致病因子作用下凝血因子或血小板被啟用，大量可溶性促凝物質入血，瀰漫性微血管內血栓形成，繼之因凝血因子及血小板被大量消耗及纖維蛋白溶解亢進而發生的出血綜合徵。臨床上，DIC患者主要表現為出血、休克、臟器功能障礙和貧血。
實驗室檢查是DIC診斷的一項重要依據，有確診意義的化驗能直接反映凝血酶或纖溶酶活性。 基於此，為了瞭解DIC的血液學變化和發病機制，初步瞭解檢查急性DIC的幾項血液學的常規方法，我組進行了本次實驗。
1. 實驗材料：
1.1 動物：健康、清潔家兔一隻（母，1.95kg，南方醫科大學實驗動物中心提供）
1.2 器材：電熱恆溫水浴箱，秒錶，小試管架，5ml試管×8，血細胞計數版，離心機，分光光度計，顯微鏡，注射器（1ml一支，5ml一支，10ml一支，50ml一支），加樣槍，2ml離心管×6，家兔手術檯，哺乳動物手術器械，手術線，紗布，粗剪，止血鉗，組織剪，眼科剪，眼科鑷，動脈夾。
1.3 藥品和試劑：4%兔腦粉生理鹽水浸液，1%硫酸魚精蛋白液，血小板稀釋液，20%烏拉坦，0.1%肝素生理鹽水，生理鹽水，飽和氯化鈉溶液。
1.4 儀器裝置：PcLab計算機生物訊號採集處理系統，壓力換能器，動靜脈插管，三通管
2. 測量指標：
2.1 凝血系統指標：血小板計數、纖維蛋白原定量
2.2 纖溶系統指標：魚精蛋白副凝試驗（3P試驗）
3. 實驗動物的製備方法及步驟：
3.1 動物麻醉固定備皮：挑選家兔，捉拿，稱量體重（Kg），按家兔體重計算麻醉量（20%烏拉坦5ml/kg），耳緣靜脈緩慢注射，待家兔四肢肌肉鬆弛，疼痛反射、角膜反射消失，呼吸平穩後，將其固定於手術檯上。用粗剪去除家兔頸部兔毛。
3.2 靜脈插管：沿家兔頸正中線切開面板，鈍性分離右側頸靜脈，穿雙線，閉夾近心端，結紮遠心端，剪開靜脈插入預先充滿生理鹽水的壓力換能器的導管。
3.3 動脈插管：鈍性分離出左頸總動脈，穿雙線，結紮遠心端，夾閉近心端，剪開動脈插入預先充滿生理鹽水並與PcLab資料採集系統透過壓力換能器相連的導管。 待各項指標穩定後，觀察並記錄正常血壓、呼吸。
3.4 取血樣本：用充有0.4ml 0.1%肝素生理鹽水的5ml注射器經頸總動脈取血3ml，分兩管，測定正常指標：3P試驗，纖維蛋白原定量，血小板計數。
3.5 複製DIC模型：經頸靜脈緩慢注射4%兔腦粉溶液（3ml/kg），注射速度為1~2ml/min。
3.6 15min後測定並記錄血壓、呼吸，採血測定3P試驗、纖維蛋白原、血小板計數並記
錄。
3.7 45min後重覆上述測量一次並記錄。
4. 試驗專案：
4.1 血小板計數(BPC)：吸血小板稀釋液0.38ml於一小試管內，用血紅蛋白吸管取血20
μl，立即加入血小板稀釋液內，充分搖勻後，用滴管將上述混懸液一小滴滴入計數板內，靜置5min後，用高倍鏡計數5箇中方格內血小板數，乘以1000，得每立方毫米血小板數。
4.2 血漿魚精蛋白副實驗(3P試驗)：取血漿0.4ml置於小試管內，加入1%硫酸魚精蛋白
液0。1ml，混勻，室溫下靜置30min，於觀察終點前，將試管輕輕搖動，有白色纖維或凝塊為陽性，均勻渾濁、無白色纖維為陰性。
4.3 纖維蛋白原定量（飽和鹽水法）：
4.3.1取血漿3ml置於試管中，加入飽和氯化鈉溶液2.7ml,充分混勻，置37℃水浴中
孵育3min
4.3.2以生理鹽水代替飽和氯化鈉溶液，進行同樣操作，作為對照管。
4.3.3以對照管調零，測出光密度（波長520mm）後，計算纖維蛋白原含量。
5. 實驗結果：
表1 DIC前後家兔各項指標的觀察與記錄
血壓
(mmHg)
150/130 正常狀態
DIC後15min 95/82
DIC後45min 65/46 呼吸頻率 (次/分) 57 66 80 血小板數量 （109/L） 160 86 60 纖維蛋白原定量 (g/L) 0.2 1.62