這個問的有些專業了!
首先說一下什麼是載體,載體的靈感其實是來自細菌的質粒(一種共價閉合環狀DNA),質粒一般是細菌抗藥性等抗性基因的所在地,而且都具有多複製(一個細菌細胞裡具有多個相同的質粒)。基因工程技術的發展就需要對DNA進行各種操作,那麼就需要一定量DNA去操作,而質粒就是很好的一個模式。所以人們就對細菌的質粒改造去掉一些不必要的基因,只留下一個骨架包含複製起始位點、篩選標記基因和多克隆位點,載體就這麼誕生了!
其次,不同的生物載體用法不同,上面說的是隻在細菌裡工作的載體。在植物基因工程研究中,若用到的是基因槍介導遺傳轉化,則還需要在載體上新增一個在植物組培期間用到的篩選標記基因。若用到的是農桿菌介導的遺傳轉化,那麼載體的骨架需要以農桿菌Ti質粒為藍本改造的載體才行,這種載體上有以左右邊界(T-border)T-DNA區。在病毒研究中還有病毒載體不是本專業的就不多說了。最常用的估計是pCAMBIA系列的了。
最後,隨著基因工程技術的發展,載體也在不斷髮生變化,比如以前的負向篩選標記基因換成了甘露糖的正向篩選標記基因。標記基因會一起伴隨遺傳變成了marker-free的loxP載體。還有可以編輯基因而不帶入外源成分的talent和正熱的CRISPR-Cas載體。
這個問的有些專業了!
首先說一下什麼是載體,載體的靈感其實是來自細菌的質粒(一種共價閉合環狀DNA),質粒一般是細菌抗藥性等抗性基因的所在地,而且都具有多複製(一個細菌細胞裡具有多個相同的質粒)。基因工程技術的發展就需要對DNA進行各種操作,那麼就需要一定量DNA去操作,而質粒就是很好的一個模式。所以人們就對細菌的質粒改造去掉一些不必要的基因,只留下一個骨架包含複製起始位點、篩選標記基因和多克隆位點,載體就這麼誕生了!
其次,不同的生物載體用法不同,上面說的是隻在細菌裡工作的載體。在植物基因工程研究中,若用到的是基因槍介導遺傳轉化,則還需要在載體上新增一個在植物組培期間用到的篩選標記基因。若用到的是農桿菌介導的遺傳轉化,那麼載體的骨架需要以農桿菌Ti質粒為藍本改造的載體才行,這種載體上有以左右邊界(T-border)T-DNA區。在病毒研究中還有病毒載體不是本專業的就不多說了。最常用的估計是pCAMBIA系列的了。
最後,隨著基因工程技術的發展,載體也在不斷髮生變化,比如以前的負向篩選標記基因換成了甘露糖的正向篩選標記基因。標記基因會一起伴隨遺傳變成了marker-free的loxP載體。還有可以編輯基因而不帶入外源成分的talent和正熱的CRISPR-Cas載體。