5.2.1 Ras/Raf通路

至今，Ras/Raf通路是最明確的訊號轉導通路.當GTP取代GDP與Ras結合，Ras被啟用後，再啟用絲蘇氨酸激酶級聯放大效應，招集細胞漿內Raf1絲蘇氨酸激酶至細胞膜上，Raf激酶磷酸化MAPK激（MAPKK),MAPKK啟用MAPK.MAPK被啟用後，轉至細胞核內，直接啟用轉錄因子.另外，MAPK刺激Fos,Jun轉錄因子形成轉錄因子AP1，該因子與myc基因旁的特異的DNA序列結合，從而啟動轉錄.myc基因產物也是轉錄因子，它能啟用其他基因.最終，這些訊號集中起來誘導D型Cyclin的表達和活性.D型Cyclin與Cyclin依賴性激酶（如CDK4和CDK6）形成複合體，該複合體的形成促使細胞從G1期進入S期.因此，Ras/Raf通路在受體訊號和G1期進展之間起著關鍵作用.然而，Ras/Raf通路不是調控G1期進展的惟一通路.Ras與Raf單獨結合不能促進Raf激酶活性，同時，Raf能被不依賴Ras的機制所啟用（例如能被Src酪氨酸激酶和PKC所啟用），MAPK也能被不依賴Ras機制（如透過調節整合素的活性）所啟用.表明級聯反應每一個訊號蛋白質都能被多個上游蛋白質所啟用，而它們也可能有另外的靶蛋白.另一個重要的Ras通路效應物是Cyc2lin依賴性激酶抑制劑P21Waf1/cip1，它被Ras所誘導，抑制Cdk2CyclinE和Cdk2CyclinA複合體的活性，從而阻斷DNA的合成.

5.2.2 Rho/Rac通路

Rho家族蛋白質是小G蛋白的Ras超家族成員，其氨基酸序列大約有30%與Ras蛋白相同，三個主要的Rho蛋白是Cdc42,Rho,Rac.Cdc42刺激Rac,Rac接下來刺激Rho.然而，這個直線模型對於精確的訊號轉導通路來說過於簡單，因為有證據顯示交叉聯絡存在，例如Cdc42不透過Rac能影響Rho的活性.下游靶點Rho激酶α的啟用，導致肌動蛋白的重新構建和P21啟用的絲蘇氨基酸激酶參與應力纖維的分解.最後Rac和Cdc42利用MAPK傳遞訊號至核內，Rho透過刺激Src和fos啟動子達到轉錄調節的作用.另外，Rac和Cdc42啟用JunN端激酶，該酶結合Jun,EIk1和ATF2等轉錄因子，這就是Rho在細胞癌變過程中起重要作用的可能機制.另一個重要Rho下游靶點是P21Waf1/cip1.Rho抑制P21Waf1/cip1誘導，有利於Ras驅動細胞進入S期[10],P21Waf1/cip1陰性細胞不需要Rho進行Ras啟用的DNA合成，降低了透過誘導P21Waf1/cip1在Ras轉化過程中的重要性. Shirakawa等[18]透過檢測P21,P53,Ki67和細胞角蛋白10發現食管鱗癌的分化程度取決於發育不良的程度，而P21在這個演化過程中起關鍵作用.Rak等發現突變的ras基因可強效刺激血管內皮細胞生長因子的表達.Thebo等[19]對有K2ras12或13密碼子突變的DukesB2期結直腸癌進行分析顯示，80%的原發灶和局域淋巴結髮生相同位點的ras基因突變，說明ras基因突變對腫瘤淋巴結轉移是高風險因素.有文獻報道，唾液腺癌中H2ras基因突變率與臨床病理指標呈高度正相關，可透過檢測基因突變來推測腫瘤所處的階段和分化程度[20].可見檢測突變的ras基因可為臨床病情的評估提供有力的依據.

Harada等[21]研究表明，P21(-）者5年生存率為64.1%,(+）者為38.0%，⑹者為11.5%,P21是決定生存率的重要而獨立的指標.但許多文獻報道ras基因突變和臨床病理指標及預後沒有明顯的關係.聯合檢測非小細胞肺癌組織中K2ras,p53和cerbB2基因的異常表達，比單項檢測可明顯地提高對預後的評估，因此，可用聯合檢測對某種腫瘤較敏感的幾個癌基因的方法來對預後進行評估. 研究表明，體外給予結腸癌細胞（HCT116/P21+/+)P21反義寡脫氧核苷酸，可提高癌細胞對放療的敏感性；用末端含CAAX鹼基的製劑作用於人類ras癌基因轉染的動物細胞，可抑制癌細胞的生長；用核糖酶（K2rasR2）拮抗突變的K2ras12細胞系，可使細胞生長停止，凋亡增加，VEGF基因表達受抑.可見用分子生物學的方法治療腫瘤是有廣闊應用前景的.

總之，雖然對ras基因，Ras蛋白及Ras訊號轉導通路的研究已達一定的深度，ras基因已在臨床有一些應用，但仍有許多問題需解決，如ras基因突變發生在腫瘤形成的那些階段，Ras訊號轉導通路與其他訊號轉導通路相互影響，相互交叉，阻斷單一訊號轉導通路能否真正起到改變或影響腫瘤發生發展的作用等.隨著對這些問題的研究，解決，人們將對腫瘤的預防，診斷和治療提供更新更有效的方法.

Ras癌基因參與人類腫瘤的發生發展，最初是在急性轉化性逆轉錄病毒實驗中從Harvey、Kirsten兩株大鼠肉瘤病毒中克隆出來的轉化基因，自1982年Weinberg等人發現人的膀胱癌細胞中有活化的H-ras基因後，引起了人們對ras癌基因在人類腫瘤發生發展過程中所起的作用的極大關注。

ras基因家族與人類腫瘤相關的基因有三種——H-ras、K-ras和N-ras，分別定位在11、12和1號染色體上。其中，K-Ras則對人類癌症影響最大，它好像分子開關：當正常時能控制調控細胞生長的路徑；發生異常時，則導致細胞持續生長，並阻止細胞自我毀滅。

5.2.1 Ras/Raf通路

至今，Ras/Raf通路是最明確的訊號轉導通路.當GTP取代GDP與Ras結合，Ras被啟用後，再啟用絲蘇氨酸激酶級聯放大效應，招集細胞漿內Raf1絲蘇氨酸激酶至細胞膜上，Raf激酶磷酸化MAPK激（MAPKK),MAPKK啟用MAPK.MAPK被啟用後，轉至細胞核內，直接啟用轉錄因子.另外，MAPK刺激Fos,Jun轉錄因子形成轉錄因子AP1，該因子與myc基因旁的特異的DNA序列結合，從而啟動轉錄.myc基因產物也是轉錄因子，它能啟用其他基因.最終，這些訊號集中起來誘導D型Cyclin的表達和活性.D型Cyclin與Cyclin依賴性激酶（如CDK4和CDK6）形成複合體，該複合體的形成促使細胞從G1期進入S期.因此，Ras/Raf通路在受體訊號和G1期進展之間起著關鍵作用.然而，Ras/Raf通路不是調控G1期進展的惟一通路.Ras與Raf單獨結合不能促進Raf激酶活性，同時，Raf能被不依賴Ras的機制所啟用（例如能被Src酪氨酸激酶和PKC所啟用），MAPK也能被不依賴Ras機制（如透過調節整合素的活性）所啟用.表明級聯反應每一個訊號蛋白質都能被多個上游蛋白質所啟用，而它們也可能有另外的靶蛋白.另一個重要的Ras通路效應物是Cyc2lin依賴性激酶抑制劑P21Waf1/cip1，它被Ras所誘導，抑制Cdk2CyclinE和Cdk2CyclinA複合體的活性，從而阻斷DNA的合成.

5.2.2 Rho/Rac通路

Rho家族蛋白質是小G蛋白的Ras超家族成員，其氨基酸序列大約有30%與Ras蛋白相同，三個主要的Rho蛋白是Cdc42,Rho,Rac.Cdc42刺激Rac,Rac接下來刺激Rho.然而，這個直線模型對於精確的訊號轉導通路來說過於簡單，因為有證據顯示交叉聯絡存在，例如Cdc42不透過Rac能影響Rho的活性.下游靶點Rho激酶α的啟用，導致肌動蛋白的重新構建和P21啟用的絲蘇氨基酸激酶參與應力纖維的分解.最後Rac和Cdc42利用MAPK傳遞訊號至核內，Rho透過刺激Src和fos啟動子達到轉錄調節的作用.另外，Rac和Cdc42啟用JunN端激酶，該酶結合Jun,EIk1和ATF2等轉錄因子，這就是Rho在細胞癌變過程中起重要作用的可能機制.另一個重要Rho下游靶點是P21Waf1/cip1.Rho抑制P21Waf1/cip1誘導，有利於Ras驅動細胞進入S期[10],P21Waf1/cip1陰性細胞不需要Rho進行Ras啟用的DNA合成，降低了透過誘導P21Waf1/cip1在Ras轉化過程中的重要性. Shirakawa等[18]透過檢測P21,P53,Ki67和細胞角蛋白10發現食管鱗癌的分化程度取決於發育不良的程度，而P21在這個演化過程中起關鍵作用.Rak等發現突變的ras基因可強效刺激血管內皮細胞生長因子的表達.Thebo等[19]對有K2ras12或13密碼子突變的DukesB2期結直腸癌進行分析顯示，80%的原發灶和局域淋巴結髮生相同位點的ras基因突變，說明ras基因突變對腫瘤淋巴結轉移是高風險因素.有文獻報道，唾液腺癌中H2ras基因突變率與臨床病理指標呈高度正相關，可透過檢測基因突變來推測腫瘤所處的階段和分化程度[20].可見檢測突變的ras基因可為臨床病情的評估提供有力的依據.

Harada等[21]研究表明，P21(-）者5年生存率為64.1%,(+）者為38.0%，⑹者為11.5%,P21是決定生存率的重要而獨立的指標.但許多文獻報道ras基因突變和臨床病理指標及預後沒有明顯的關係.聯合檢測非小細胞肺癌組織中K2ras,p53和cerbB2基因的異常表達，比單項檢測可明顯地提高對預後的評估，因此，可用聯合檢測對某種腫瘤較敏感的幾個癌基因的方法來對預後進行評估. 研究表明，體外給予結腸癌細胞（HCT116/P21+/+)P21反義寡脫氧核苷酸，可提高癌細胞對放療的敏感性；用末端含CAAX鹼基的製劑作用於人類ras癌基因轉染的動物細胞，可抑制癌細胞的生長；用核糖酶（K2rasR2）拮抗突變的K2ras12細胞系，可使細胞生長停止，凋亡增加，VEGF基因表達受抑.可見用分子生物學的方法治療腫瘤是有廣闊應用前景的.

總之，雖然對ras基因，Ras蛋白及Ras訊號轉導通路的研究已達一定的深度，ras基因已在臨床有一些應用，但仍有許多問題需解決，如ras基因突變發生在腫瘤形成的那些階段，Ras訊號轉導通路與其他訊號轉導通路相互影響，相互交叉，阻斷單一訊號轉導通路能否真正起到改變或影響腫瘤發生發展的作用等.隨著對這些問題的研究，解決，人們將對腫瘤的預防，診斷和治療提供更新更有效的方法.

Ras癌基因參與人類腫瘤的發生發展，最初是在急性轉化性逆轉錄病毒實驗中從Harvey、Kirsten兩株大鼠肉瘤病毒中克隆出來的轉化基因，自1982年Weinberg等人發現人的膀胱癌細胞中有活化的H-ras基因後，引起了人們對ras癌基因在人類腫瘤發生發展過程中所起的作用的極大關注。

ras基因家族與人類腫瘤相關的基因有三種——H-ras、K-ras和N-ras，分別定位在11、12和1號染色體上。其中，K-Ras則對人類癌症影響最大，它好像分子開關：當正常時能控制調控細胞生長的路徑；發生異常時，則導致細胞持續生長，並阻止細胞自我毀滅。