1、環境清潔 進行無菌技術操作前半小時，須停止清掃地面等工作，避免不必要的人群流動，減少人員走動，以降低室內空氣中的塵埃。防止塵埃飛揚。治療室每日用紫外線照射消毒一次，時間20~30分鐘即可，也可適當延長消毒時間。

2、無菌操作 衣帽穿戴要整潔。帽子要把全部頭髮遮蓋，口罩須遮住口鼻，並修剪指甲，洗手。必要時穿好無菌衣，帶好無菌手套。

3、物品管理 無菌物品與非無菌物品應分別放置，無菌物品不可暴露在空氣中，必須存放於無菌包或無菌容器內，無菌物品一經使用後，必須再經無菌處理後方可使用，從無菌容器中取出的物品，雖未使用，也不可放回無菌容器內。

4、無菌物品 無菌物品必須存放於無菌包或無菌容器內，無菌包應註明無菌名稱，消毒滅菌日期，有效期一週為宜，並按日期先後順序排放，以便取用，放在固定的地方。無菌包在未被汙染的情況下，可儲存7天，過期應重新滅菌。無菌物品一經使用或過期，潮溼應重新進行滅菌處理。

5、取無菌物 操作者身距無菌區20cm，取無菌物品時須用無菌持物鉗（鑷），不可觸及無菌物品或跨越無菌區域，手臂應保持在腰部以上。無菌物品取出後，不可過久暴露，若未使用，也不可放回無菌包或無菌容器內。疑有汙染，不得使用。未經消毒的物品不可觸及無菌物或跨越無菌區。