無菌操作原則

一、在執行無菌操作時，必須明確物品的無菌區和非無菌區。

二、執行無菌操作前，先戴帽子、口罩、洗手，並將手擦乾，注意空氣和環境清潔。

三、夾取無菌物品，必須使用無菌持物鉗。

四、進行無菌操作時，凡未經消毒的手、臂、均不可直接接觸無菌物品或超過無菌區取物。

五、無菌物品必須儲存在無菌包或滅菌容器內，不可暴露在空氣中過久。無菌物與非無菌物應分別放置。無菌包一經開啟即不能視為絕對無菌，應儘早使用。凡已取出的無菌物品雖未使用也不可再放回無菌容器內。

六、無菌包應按消毒日期順序放置在固定的櫃櫥內，並保持清潔乾燥，與非滅菌包分開放置，並經常檢查無菌包或容器是否過期，其中用物是否適量。

七、無菌鹽水及酒精、新潔爾滅棉球罐每週消毒一次，容器內敷料如干棉球、紗布塊等，不可裝得過滿，以免取用時碰在容器外面被汙染。無菌操作技術及注意事項　　1、玻璃器皿的消毒和清潔　　⑴新購玻璃器皿的處理新購玻璃器皿應用熱肥皂水洗刷，流水沖洗，再用1％～2%鹽酸溶液浸泡，以除去遊離鹼，再用水沖洗。對容量較大的器皿如試劑瓶、燒瓶或量具等，經清水洗淨後應注入濃鹽酸少許，慢慢轉動，使鹽酸佈滿容器內壁數分鐘後傾出鹽酸，再用水沖洗。　　⑵汙染玻璃器皿的處理　　①一般試管或容器可用3％煤酚皂溶液或5％石炭酸浸泡，再煮沸30分鐘，或在3％～5％漂白粉澄清液內4小時，有的亦可用肥皂或合成洗滌劑洗刷使盡量產生泡沫，然後用清水沖洗至無肥皂為止。最後用少量蒸餾水沖洗。　　②細菌培養用的試管和培養皿可先行集中，用1kg/cm2高壓滅菌15～30分鐘，再用熱水洗滌後，用肥皂洗刷，流水沖洗。　　③吸管使用後應集中於3%煤酚皂溶液中浸泡24小時，逐支用流水反覆沖洗，再用蒸餾水沖洗。　　④油蠟沾汙的器皿，應單獨滅菌洗滌，先將沾有油汙的物質棄去，倒置於吸水紙上，100℃烘乾半小時，再用鹼水煮沸，肥皂洗滌，流水沖洗。必要時可用二甲苯或汽油去油汙。　　⑤染料沾汙的器皿，可先用水沖洗，後用清潔或稀鹽酸洗脫染料，再用清水沖洗。一般染色劑呈鹼性，所以不宜用肥皂的鹼水洗滌。　　⑥玻片可置於3％煤酚皂溶液中浸泡，取出後流水沖洗，再用肥皂或弱鹼性煮沸，自然冷卻後，流水沖洗。被結核桿菌汙染或不易洗淨的玻片，可置於清潔液內浸泡後再衝洗。　　2、無菌器材和液體的準備將玻璃器具中的培養皿、培養瓶、試管、吸管等按上述方法洗淨烘乾後，用一潔淨紙包好瓶口並把吸管尾端塞上棉花，裝入乾淨的鋁盒或鐵盒中，於120℃的乾燥箱中乾燥滅菌２小時，取出備用。對於手術器械、瓶塞、工作服以及新配製的PBS洗液，則採用高壓蒸氣滅菌法，即在15磅的條件下，加熱20分鐘。而對於MEM培養液、小牛血清和消化液等需用G5或G6濾器負壓抽濾後使用。　　3、無菌操作過程在無菌操作過程中，最重要的是要保持工作區的無菌、清潔。因此，在操作前20～30分鐘要先啟動超淨臺和紫外燈，並認真洗手和消毒。在操作時，嚴禁喧譁，嚴禁用手直接拿無菌物品，如瓶塞等，而必須用消毒的止血鉗、鑷子等。培養瓶應在超淨臺內操作，並且在開啟和加蓋瓶塞時需反覆用酒精燈燒。對於吸管應先用手拿後1/3處，戴上膠皮乳頭，並用酒精燈燒烤之後再吸液體。　　4、常用清潔液的配製法⑴重鉻酸鉀清潔液：可根據不同需要，選用下列的任何一種濃度。先將重鉻酸鉀溶於水中，再慢慢加入濃硫酸。注意，此時可產生高熱，應防止容器破裂。重鉻酸鉀清潔液除汙力強，腐蝕性大，應避免接觸面板和衣服。為防止吸收空氣的水分而變質，此液應貯存於帶蓋的容器中。如清潔效力較差，可再加入少量重鉻酸鉀及濃硫酸，還可繼續使用。直到液體變藍綠色，即不能再用。配製重鉻酸鉀清潔液時，宜用耐高溫的陶瓷缸或耐酸搪瓷或塑膠容器。使用玻璃器皿時，應特別注意防止產生高熱而破裂，切忌用量筒來配製。　　⑵磷酸三鈉將其配成5％～10％水溶液，可用於洗滌玻璃器皿上的油汙，但經常使用腐蝕玻璃，使器皿表面模糊、毛糙。　　⑶硝酸清潔液將其配成50％水溶液，可用於清潔微量滴定筒。⑷乙二胺四乙酸二鈉（EDTA鈉鹽）將其配成5％～10%水溶液，可洗脫粘附於玻璃器皿內壁的白色沉澱物。⑸尿素溶液尿素是溶解蛋白質的良好溶劑，適用於洗滌粘附有血液血清等蛋白質的吸管、試管等。

1、滅菌物品應存放在無菌物品存放間的存放架或存放櫃內，存放架或存放櫃應便於清潔，不易生鏽；儲存環境應清潔、明亮、通風或有空氣淨化裝置，照明光線充足；溫度低於24℃，溼度低於70%。

2、滅菌物品應分類存放，一次性無菌物品應去掉外層大包裝存放，存放位置相對固定，標識清晰；物品存放應距地面20~25cm，距牆壁5~10cm，距天花板50cm。

3、手術室、治療室、換藥室等採用自然通風的，當通風不良時可使用排氣扇強制換氣；無菌物品儲存環境均應每日清潔，物體表面及地面溼式擦拭，避免揚塵。

擴充套件資料

關於無菌物品的使用原則

1、操作環境應清潔、寬敞、定期消毒；物品佈局合理；無菌操作前半小時應停止清掃工作、減少走動、避免塵土飛揚。

2、工作人員應做好個人準備，戴好帽子、口罩，修剪指甲並洗手，必要時穿無菌衣、帶無菌手套。

3、工作人員應面向無菌區，手臂應保持在腰部或操作檯檯面以上，不可跨越無菌區避免面對無菌區談笑、咳嗽、打噴嚏。

4、用無菌持物鑷取用物品；無菌物品一經取出，即使未用，也不可放回無菌容器內；一套無菌物品僅供一位患者使用，避免交叉感染。

5、無菌操作中，無菌物品疑有汙染或已被汙染，應予更換並重新滅菌。

6、無菌物品必須與非無菌物品分開放置。

7、無菌物品不可暴露於空氣中，應存放於無菌包或無菌容器中，無菌包外須標明物品名稱、滅菌日期，並按失效期先後順序排放。

8、定期檢查無菌物品的滅菌日期及儲存情況。無菌包在未被汙染的情況下儲存期一般為7天，過期或受潮應重新滅菌。