最近做PCR實驗好幾次都擴不出來(鬱悶死，以前從沒這問題)，反應體系和條件都是以前一見摸索好了的，唯一可能的問題就是試劑出問題了。 PCR引物存放時間，這要看是什麼狀態，要是粉末的話，在-20度可以存放好幾年;要是已經把引物稀釋成液體狀態的話，存放時間就要短一點了，但也可以存放一年左右的時間，甚至更長。 不過這也要看你們實驗室的冰箱是不是經常開啟，要是是的話，存放時間就很受影響，實驗室的冰箱就是經常開啟，而且有時候大家找東西要找好長時間，所以引物總是用半個多月的時間，效力就下降了，PCR後的條帶明顯就沒有以前亮了。 建議你合成引物的時候，讓公司每個OD分裝成一管，每次你用的時候，取一管稀釋成使用濃度;或者先稀釋到儲存濃度，分裝後要用的時候再稀釋到使用濃度。另外一定要注意避免反覆凍融，反覆凍融會使存放時間變短的。 最簡單的就是分裝了,以儲存濃度儲存,稀釋10或20微升,就可以用好些次,即可避免反覆凍融還可以避免整管引物都被汙染. 乾粉-20度可以儲存一年，稀釋後-20度可以儲存半年。 可以先稀釋成100uM，分裝成幾管。然後再稀釋成50uM和20uM的。每次用20uM的做PCR即可。儘量避免反覆凍融。 稀釋用的水PH值要求大於7(TE比滅菌去離子水好)，並且無菌。 真空乾燥的DNA呈幹膜狀或粉末狀在離心管底部，開啟瓶蓋時小心不要丟失。