1482年達·芬奇來到米蘭，應聖弗朗切斯科教堂的邀請繪製祭壇畫《巖間聖母》。這幅現藏於巴黎的作品，雖仍然是傳統題材，但人物形象的塑造和巖窟幽深的刻畫及山岩間花草*真的描繪，證明他使用的煙霧狀筆法已使其在傳真寫實和藝術加工方面達到了新的水平。尤其,這幅畫,達芬奇在很久以後,又創作了一幅,雖佈局並無多大變換,但人物的動作等方面,有了一定的變化.應該算是對第一幅<<巖間聖母>>的更正.現藏於英國.《最後的晚餐》是他在這一時期創作中最負盛名之作。這幅表現基督被捕前和門徒最後會餐訣別場面的溼壁畫，繪製在米蘭聖瑪麗亞·德拉格拉齊耶修道院飯廳。巧妙的構圖和獨具匠心的經營佈局，使畫面上的廳堂與生活中的飯廳建築結構緊密聯結在一起，使觀者感覺畫中的情景似乎就發生在眼前。在人物佈局上，一反平列於飯桌的形式，將基督獨立於畫面中央，其他門徒透過各自不同的手勢、表情，分別表現出驚恐、憤怒、懷疑、剖白和慌張的情緒。這種典型性格的描繪，突出了繪畫的主題，它與構圖的統一效果互為補充，堪稱美術史上最完美的典範之作。1500年達·芬奇回到佛羅倫薩，隨著共和制度的恢復，文化氣氛一度活躍，畫壇上也先後出現了米開朗琪羅、拉斐爾等傑出人物。他向市民展出的一幅經過精心構思的《聖母子與聖安娜》素描草圖，立即引起轟動，其構圖原理和畫法對藝術界有極大影響，米開朗琪羅和拉斐爾等人也從中得到啟發。1503年他一面著手為市政廳大會議廳繪製壁畫（因再次去米蘭而始終未完成），一面創作《蒙娜麗莎》和《聖母子與聖安娜》。這是兩幅他極為珍愛的作品，始終帶在身邊，晚年移居法國也不離左右，最後遺存巴黎。

準確的來說最著名的是蒙娜麗莎

油畫：

《音樂家肖像》

《抱銀貂的女子》

《紡車邊的聖母》

《基督受洗》 ( 15世紀)

《受胎告知》 ( 15世紀)

《博士來朝》 ( 15世紀)

《哺乳聖母》( 15世紀)

《巖間聖母》( 15世紀)

《拈花聖母》( 15世紀)

《吉內薇拉·班琪》 ( 15世紀)

《柏諾瓦的聖母》 ( 15世紀)

《蒙娜麗莎》 ( 16世紀)

《莉妲和天鵝》 ( 16世紀)

《聖母子與聖安妮》《施洗者聖約翰》 ( 15世紀-16世紀)

壁畫：

《最後的晚餐》（15世紀）