【摘要】 目的 比較病人用EDTA抗凝血和枸櫞酸鈉抗凝血檢測PT、INR結果的差異。方法 120位受試物件用枸櫞酸鈉和EDTA抗凝各採兩管血，分離血漿後在STAGO儀器上檢測PT，對兩種抗凝方式所得PT、INR結果進行線性迴歸分析，分析其相關性及其結果間有無顯著性差異。結果 以枸櫞酸鈉法測得PT為y，EDTA法測得PT為x，兩者間PT線性方程為y=0.86x-2.8，R2=0.97，PT結果相關性好，但差異有顯著性。INR線性方程為y=0.95x+0.03，R2=0.98，相關性好且差異無顯著性。討論 EDTA抗凝血漿檢測PT在臨床上是可接受的，但前提條件是應建立自己的參考區間，報告INR結果時還應統計EDTA抗凝血的MNPT（正常人平均PT），根據公式INR=（PT/MNPT）ISI計算INR值。
【關鍵詞】 EDTA; 凝血酶原時間
現階段進行凝血專案檢測都是用枸櫞酸鈉抗凝，抽取血液量與枸櫞酸鈉的比例是9：1，在真空採血管中包含固定量的0.3 ml抗凝劑，真空採血管內的負壓保證了從血管中吸出2.7 ml血液。但是在實際情況中偶爾會發生血液量不足的問題，比例發生改變會影響凝血結果[1]。使用EDTA抗凝管可能會解決這個問題，因為EDTA粉末在抗凝過程中幾乎不對血液造成稀釋，也就不會發生稀釋比例的改變。本文研究在於詮釋用EDTA抗凝時所測得的PT、INR結果與枸櫞酸鈉抗凝時的相關性。
1 材料和方法
1.1 儀器和試劑 Stago 公司生產的STA型全自動凝血分析儀，使用Stago 公司配套試劑，配套質控品。Dade-Behring公司生產的INR校準血漿；
1.3 實驗方法
1.3.1 枸櫞酸鈉抗凝血MNPT的計算 同一儀器使用不同生產廠家、不同批號的凝血活酶試劑所計算出的正常人平均PT（MNPT）值是不一樣的，故我們應重測所用凝血活酶試劑匹配的儀器MNPT值，而不應使用生產廠家給我們提供的MNPT值[2]。計算MNPT需要至少20份正常血漿。本實驗我們挑選60名健康體檢者，經過儀器測試PT值，剔除>2S的資料, 經統計學處理，計算得出枸櫞酸鈉抗凝血的MNPT值。
1.3.2 EDTA抗凝血MNPT的計算 60名健康體檢者的EDTA抗凝血，測試PT結果後，剔除>2S的資料, 經統計學處理，計算得出EDTA抗凝血的MNPT值。
1.3.3 Local ISI(儀器區域國際敏感指數)的建立 儀器不可使用試劑說明書上附帶的ISI值，因為此ISI值是試劑製造商用手工方法所測出的，並非是實驗室儀器對所用批號凝血活酶試劑的Local ISI[3]，所以要重新建立Local ISI。用已標註INR值的校準血漿復溶後，在Stago儀器上測PT 2～3次，得出PT秒數均值，INR=（PT/MNPT）Local ISI，將枸櫞酸鈉及EDTA抗凝血各自的MNPT結果及已知的INR結果代入上式，即可求出Local ISI=lgINR/(lgPT－lgMNPT)，故能分別求出兩種抗凝方式各自的Local ISI。
1.3.4 PT、INR的檢測 本院健康體檢者標本60例，本院心胸外科心臟瓣膜置換術後及其它原因致PT延長病人標本60例用枸櫞酸鈉和EDTA抗凝管各抽一管血，3 500 r/min離心5 min,以製備乏血小板血漿，在4 h內完成檢測。根據公式INR=（PT/MNPT）Local ISI，得到INR值。
1.4 統計學方法 對枸櫞酸鈉和EDTA抗凝所得的各120份標本的PT、INR結果進行線性迴歸統計，分析其相關性，並用配對t檢驗分析兩者間是否存在顯著性差異。
2 結 果
2.1 MNPT結果 櫞酸鈉抗凝血MNPT為13.8 s，EDTA抗凝血MNPT為18.6 s。
2.2 Local ISI結果 櫞酸鈉抗凝血Local ISI為1.24，EDTA抗凝血Local ISI為1.33。
2.3 枸櫞酸鈉抗凝血的PT結果為y，EDTA抗凝血的PT結果為x，結果見表1。經線性迴歸統計，兩者間PT線性方程為y=0.86x-2.8，R2=0.97, PT結果相關性好，經配對t檢驗，t=-29.8,P=0.0
2.4 枸櫞酸鈉抗凝血的INR結果為y，EDTA抗凝血的INR結果為x，結果見表1。經線性迴歸統計，兩者間INR線性方程為y=0.95x+0.03，R2=0.98, INR結果相關性好，經配對t檢驗，t=0.699，P=0.492>0.05，差異無顯著性。表1 枸櫞酸鈉與EDTA抗凝血的PT、INR檢測結果
3 討 論
3.1 研究發現PT、INR結果間是有相關性的，在臨床上使用EDTA抗凝管檢測PT是可行的。但同時也發現，PT結果間差異有顯著性，兩種抗凝方式下PT的生物參考區間是不同的，所以要建立EDTA抗凝下PT的參考區間。INR結果間差異無顯著性，因為我們重新計算了EDTA抗凝下的MNPT，從上述結果可見，EDTA抗凝下的MNPT比枸櫞酸鈉抗凝下MNPT要長，透過PT/MNPT在一定程度上消減了EDTA抗凝下PT的延長，INR結果有良好的相關性。因此我們可以報告INR結果或者透過公式換算PT結果y=0.86x-2.8。
3.2 PT結果間的差異主要是因為標本的稀釋不同造成的，因為枸櫞酸鈉抗凝管中存在0.3 ml抗凝劑，血液：抗凝劑=9：1，而EDTA管中抗凝劑是固體粉末，加入血液後幾乎不對血液稀釋，因而抽取血液量的多少十分關鍵，這也是分析前質量控制的一個環節。
3.3 使用EDTA抗凝血的優勢在於抗凝管可與血液學分析使用同一管血液，血樣進行完血液學分析後可分離血漿，用於凝血專案檢測，便於檢驗科儀器自動化的建立。使用一管血液不僅節省抗凝管，而且病人沒有必要抽取更多管血液，也便於醫療廢棄物的處理，不會因為血量的多少造成稀釋不同而影響結果。
3.4 本文使用經過計算的EDTA抗凝下的Local ISI，與枸櫞酸鈉抗凝下的Local ISI是不一樣的，因為現階段沒有EDTA抗凝下的INR定值血漿存在，以後若有INR定值血漿來校準ISI會使得EDTA抗凝的使用更方便，更有市場。
【參考文獻】
[1] 徐愛麗,毛慶民,張樂研.標本採集量對PT、APTT檢測結果的影響[J].臨床軍醫雜誌,2007,35(6):913.
[2] 倪贊明，徐明光，王曉明，等.凝血酶原時間ISI/INR系統測定中的一些問題及改進意見[J]檢驗醫學,2006,21(5):492?495.
[3] 許蕾,王學鋒,李泳，等.血漿凝血酶原時間測定中建立儀器區域國際敏感指數的實驗控討[J]檢驗醫學,2004,19(5):441?443.
【摘要】 目的 比較病人用EDTA抗凝血和枸櫞酸鈉抗凝血檢測PT、INR結果的差異。方法 120位受試物件用枸櫞酸鈉和EDTA抗凝各採兩管血，分離血漿後在STAGO儀器上檢測PT，對兩種抗凝方式所得PT、INR結果進行線性迴歸分析，分析其相關性及其結果間有無顯著性差異。結果 以枸櫞酸鈉法測得PT為y，EDTA法測得PT為x，兩者間PT線性方程為y=0.86x-2.8，R2=0.97，PT結果相關性好，但差異有顯著性。INR線性方程為y=0.95x+0.03，R2=0.98，相關性好且差異無顯著性。討論 EDTA抗凝血漿檢測PT在臨床上是可接受的，但前提條件是應建立自己的參考區間，報告INR結果時還應統計EDTA抗凝血的MNPT（正常人平均PT），根據公式INR=（PT/MNPT）ISI計算INR值。
【關鍵詞】 EDTA; 凝血酶原時間
現階段進行凝血專案檢測都是用枸櫞酸鈉抗凝，抽取血液量與枸櫞酸鈉的比例是9：1，在真空採血管中包含固定量的0.3 ml抗凝劑，真空採血管內的負壓保證了從血管中吸出2.7 ml血液。但是在實際情況中偶爾會發生血液量不足的問題，比例發生改變會影響凝血結果[1]。使用EDTA抗凝管可能會解決這個問題，因為EDTA粉末在抗凝過程中幾乎不對血液造成稀釋，也就不會發生稀釋比例的改變。本文研究在於詮釋用EDTA抗凝時所測得的PT、INR結果與枸櫞酸鈉抗凝時的相關性。
1 材料和方法
1.1 儀器和試劑 Stago 公司生產的STA型全自動凝血分析儀，使用Stago 公司配套試劑，配套質控品。Dade-Behring公司生產的INR校準血漿；
1.3 實驗方法
1.3.1 枸櫞酸鈉抗凝血MNPT的計算 同一儀器使用不同生產廠家、不同批號的凝血活酶試劑所計算出的正常人平均PT（MNPT）值是不一樣的，故我們應重測所用凝血活酶試劑匹配的儀器MNPT值，而不應使用生產廠家給我們提供的MNPT值[2]。計算MNPT需要至少20份正常血漿。本實驗我們挑選60名健康體檢者，經過儀器測試PT值，剔除>2S的資料, 經統計學處理，計算得出枸櫞酸鈉抗凝血的MNPT值。
1.3.2 EDTA抗凝血MNPT的計算 60名健康體檢者的EDTA抗凝血，測試PT結果後，剔除>2S的資料, 經統計學處理，計算得出EDTA抗凝血的MNPT值。
1.3.3 Local ISI(儀器區域國際敏感指數)的建立 儀器不可使用試劑說明書上附帶的ISI值，因為此ISI值是試劑製造商用手工方法所測出的，並非是實驗室儀器對所用批號凝血活酶試劑的Local ISI[3]，所以要重新建立Local ISI。用已標註INR值的校準血漿復溶後，在Stago儀器上測PT 2～3次，得出PT秒數均值，INR=（PT/MNPT）Local ISI，將枸櫞酸鈉及EDTA抗凝血各自的MNPT結果及已知的INR結果代入上式，即可求出Local ISI=lgINR/(lgPT－lgMNPT)，故能分別求出兩種抗凝方式各自的Local ISI。
1.3.4 PT、INR的檢測 本院健康體檢者標本60例，本院心胸外科心臟瓣膜置換術後及其它原因致PT延長病人標本60例用枸櫞酸鈉和EDTA抗凝管各抽一管血，3 500 r/min離心5 min,以製備乏血小板血漿，在4 h內完成檢測。根據公式INR=（PT/MNPT）Local ISI，得到INR值。
1.4 統計學方法 對枸櫞酸鈉和EDTA抗凝所得的各120份標本的PT、INR結果進行線性迴歸統計，分析其相關性，並用配對t檢驗分析兩者間是否存在顯著性差異。
2 結 果
2.1 MNPT結果 櫞酸鈉抗凝血MNPT為13.8 s，EDTA抗凝血MNPT為18.6 s。
2.2 Local ISI結果 櫞酸鈉抗凝血Local ISI為1.24，EDTA抗凝血Local ISI為1.33。
2.3 枸櫞酸鈉抗凝血的PT結果為y，EDTA抗凝血的PT結果為x，結果見表1。經線性迴歸統計，兩者間PT線性方程為y=0.86x-2.8，R2=0.97, PT結果相關性好，經配對t檢驗，t=-29.8,P=0.0
2.4 枸櫞酸鈉抗凝血的INR結果為y，EDTA抗凝血的INR結果為x，結果見表1。經線性迴歸統計，兩者間INR線性方程為y=0.95x+0.03，R2=0.98, INR結果相關性好，經配對t檢驗，t=0.699，P=0.492>0.05，差異無顯著性。表1 枸櫞酸鈉與EDTA抗凝血的PT、INR檢測結果
3 討 論
3.1 研究發現PT、INR結果間是有相關性的，在臨床上使用EDTA抗凝管檢測PT是可行的。但同時也發現，PT結果間差異有顯著性，兩種抗凝方式下PT的生物參考區間是不同的，所以要建立EDTA抗凝下PT的參考區間。INR結果間差異無顯著性，因為我們重新計算了EDTA抗凝下的MNPT，從上述結果可見，EDTA抗凝下的MNPT比枸櫞酸鈉抗凝下MNPT要長，透過PT/MNPT在一定程度上消減了EDTA抗凝下PT的延長，INR結果有良好的相關性。因此我們可以報告INR結果或者透過公式換算PT結果y=0.86x-2.8。
3.2 PT結果間的差異主要是因為標本的稀釋不同造成的，因為枸櫞酸鈉抗凝管中存在0.3 ml抗凝劑，血液：抗凝劑=9：1，而EDTA管中抗凝劑是固體粉末，加入血液後幾乎不對血液稀釋，因而抽取血液量的多少十分關鍵，這也是分析前質量控制的一個環節。
3.3 使用EDTA抗凝血的優勢在於抗凝管可與血液學分析使用同一管血液，血樣進行完血液學分析後可分離血漿，用於凝血專案檢測，便於檢驗科儀器自動化的建立。使用一管血液不僅節省抗凝管，而且病人沒有必要抽取更多管血液，也便於醫療廢棄物的處理，不會因為血量的多少造成稀釋不同而影響結果。
3.4 本文使用經過計算的EDTA抗凝下的Local ISI，與枸櫞酸鈉抗凝下的Local ISI是不一樣的，因為現階段沒有EDTA抗凝下的INR定值血漿存在，以後若有INR定值血漿來校準ISI會使得EDTA抗凝的使用更方便，更有市場。
【參考文獻】
[1] 徐愛麗,毛慶民,張樂研.標本採集量對PT、APTT檢測結果的影響[J].臨床軍醫雜誌,2007,35(6):913.
[2] 倪贊明，徐明光，王曉明，等.凝血酶原時間ISI/INR系統測定中的一些問題及改進意見[J]檢驗醫學,2006,21(5):492?495.
[3] 許蕾,王學鋒,李泳，等.血漿凝血酶原時間測定中建立儀器區域國際敏感指數的實驗控討[J]檢驗醫學,2004,19(5):441?443.