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      骨源性鹼性磷酸酶不等於鹼性磷酸酶

      骨源性鹼性磷酸酶 是一種病叫佝僂病

      小兒佝僂病是兒保防治的四病之一,是兒科常見、多發病,由於日照不足,北方高發,雖經多年防治,其患病率仍高達31.7%。廠商由於缺乏對鈣營養問題的科學認識或出於商業目的,在媒體上大肆炒作,致使廣大家長盲目給孩子補鈣,而對維生素D的作用認識不足,因其過量應用易產生中毒症狀,也出現了醫生指導維生素D治療的偏差,為避免中毒而出現用量不足,延誤了治療。是因為以往的檢測指標不能及時、準確反映機體鈣狀態。

      〔1〕 兒童期AKP主要以NBAP為主,約佔AKP的51%,但AKP受其他組織器官疾病的影響較大,故認為NBAP更能準確反映骨代謝情況,NBAP作為兒童期骨代謝指標明顯優於AKP

      〔2〕 應用骨源性鹼性磷酸酶(NBAP)這一反映骨代謝狀況的較好生化指標,對門診6個月~3歲兒童進行NBAP檢測,同時測定血鈣(Ca)、血磷(P)、鹼性磷酸酶活性(AKP),對其敏感度、特異度、準確性進行評價,同時指導兒童科學補鈣,觀察療效。

      診斷 簡易診斷:按1986年衛生部頒發的佝僂病簡易診斷標準進行篩查,簡易診斷依據病史、症狀、體徵為指標,其中體徵為主要條件。診斷時結合年齡、季節、餵養、維生素D缺乏史及其他病史等進行綜合分析決定。NBAP診斷標準 〔2〕 :0~7歲小兒NBAP≤200u/L為正常;201~250u/L為亞臨床狀態 〔3〕 ;>250u/L為診斷界限。

      生化檢查 採靜脈血進行血鈣(Ca)、血磷(P)、鹼性磷酸酶活性(AKP),NBAP檢測。血清鈣、磷、AKP在7170A全自動生化分析儀上測定,各引數均按儀器進行設定;NBAP採用北京中生生物工程高科技公司提供的NBAP試劑盒;幹化學免疫法,按北京中生協和醫學科學技術開發公司研製的試劑盒說明書操作。

      治療 對於NBAP檢測>200u/L者給予膽維丁乳15mg治療,1個月、2個月及3個月後複查血鈣(Ca)、血磷(P)、AKP及NBAP,NBAP仍高於200u/L者再給予膽維丁乳15mg治療,評價療效。

      鹼性磷酸酶屬於同源二聚體蛋白

      人體內情況

      鹼性磷酸酶是廣泛分佈於人體各臟器器官中,其中以肝臟為最多其次為腎臟,骨骼、腸、和胎盤等組織,。這種酶能催化核酸分子脫掉5’磷酸基團,從而使DNA或RNA片段的5’-P末端轉換成5’-OH末端。但它不是單一的酶,而是一組同功酶。目前已發現有 AKP1 、 AKP2 、 AKP3 、 AKP4 、 AKP5 與 AKP6 六種同功酶。其中第 1 、 2 、 6 種均來自肝臟,第 3 種來自骨細胞,第 4 種產生於胎盤及癌細胞,而第 5 種則來自小腸絨毛上皮與成纖維細胞。 血清中的ALP主要來自肝臟和骨骼。生長期兒童血清內的大多數來自成骨細胞和生長中的骨軟骨細胞,少量來自肝。尿中的直接來自於腎小管細胞,並非來源於血液。

      鹼性磷酸酶主要用於阻塞性黃疸、原發性肝癌、繼發性肝癌、膽汁淤積性肝炎等的檢查。患這些疾病時,肝細胞過度製造ALP,經淋巴道和肝竇進入血液,同時由於肝內膽道膽汁排洩障礙,反流入血而引起血清鹼性磷酸酶明顯升高。但由於骨組織中此酶亦很活躍。因此,孕婦、骨折癒合期、骨軟化症。佝僂病、骨細胞癌、骨質疏鬆、肝膿腫、肝結核、肝硬變、白血病、甲狀腺機能亢進時,血清鹼性磷酸酶亦可升高,應加以鑑別。

      研究應用

      鹼性磷酸酶也是目前免疫診斷試劑產品最常用的標記酶之一。與辣根過氧化物酶(HRP)相比,ALP用作標記酶的優點是,穩定性高、靈敏度高,缺點是成本高,標記困難。 在研究中最常用的ALP如下: ◇細菌鹼性磷酸酶Bacterial alkaline phosphatase (BAP), 來源:Escherichia coli C4 ; ◇ Shrimp alkaline phosphatase (SAP), 來源:一種北極蝦 (Pandalus borealis) ; ◇ 小牛腸鹼性磷酸酶Calf Intestinal Alkaline Phosphatase (CIP); ◇ 胎盤鹼性磷酸酶Placental alkaline phosphatase (PALP)和分泌性鹼性磷酸酶the secreted alkaline phosphatase (SEAP),後者是前者的C末端短缺版——與PALP相比,SEAP沒有PALP的C末端最後24個氨基酸(這24個氨基酸構成了與糖基化磷脂醯肌醇靶向錨定的區域) ALP主要應用於分子生物學和酶免分析中: ★分子生物學中主要用作核酸的去磷酸化。因為DNA通常會在5"端結合磷酸基團,用ALP去磷酸化能防止DNA分子5"端與3"端連線,從而在後續步驟準備好之前讓DNA分子抑制處於線性化狀態;同樣,透過去磷酸化可用作放射標記示蹤。通常用作這些目的用的最多的是Shrimp alkaline phosphatase (SAP),因為在反應完成之後它是最容易滅活的。 ★酶免分析中應用最多的是ELISA,以競爭法測小分子抗原為例,抗體先與固相載體結合,然後讓待測樣品與事先經ALP標記過的該抗原競爭地與抗體結合,洗去未反應的過量ALP-抗原,加入顯色底物。則可以透過與按梯度濃度變化的標準品繪出的標準曲線對比從而知道待測樣品中抗原的濃度。ELISA中用的比較多的是 辣根過氧化物酶(HRP),底物為OPD, 深桔黃色 ,檢測波長492nm;TMB, 藍綠色,檢測波長450nm 鹼性磷酸酶,底物為PNPP(對-消基苯磷酸酯), 黃色 ,檢測波長405nm ★目前工業上一個普遍的應用是作為檢驗牛奶的巴斯的滅菌的標誌:被巴斯德過高溫滅菌的分子會被滅活,向其中和未巴斯滅菌的牛奶中加入ALP的底物,2分鐘後未滅菌的樣品應該顯黃色,如果待測樣品(指被巴斯滅菌過的牛奶)也能呈現相同顏色,則說明巴斯滅菌溫度未過度。當然總有例外,因為有少數細菌會產生耐熱的ALP。

      [編輯本段]測定方法

      有很多種,中國曾應用較廣的為磷酸苯二鈉比色法,但現在應用較多的是連續檢測法。

      正常範圍(連續監測法)

      女性,1-12歲小於500U/L;大於15歲,40-150U/L;

      男性,1-12歲小於500U/L;12-15歲,小於750U/L;大於15歲,40-150U/L。 高值可能說明有單管阻塞現象;低值更多出現於兒童和孕婦身上。高值表明有可能發生了活性骨沉積(這個可能譯的不準,請指正,原文為active bone deposition),因為ALP是成骨細胞活動(造骨)的副產物(例如在佩吉氏斯症[畸形性骨炎]的案例中)。 一般來說,低值要比高值少見。

      臨床意義

      臨床上測定ALP主要用於骨骼 、肝膽系統疾病的診斷和鑑別診斷,尤其是黃疸的鑑別診斷。對於不明原因的高ALP血清水平,可測定同工酶以協助明確其器官來源。 1.生理性增高:兒童在生理性的骨骼發育期,鹼性磷酸酶活力可比正常人高1~2倍。處於生長期的青少年,以及孕婦和進食脂肪含量高的食物後均可以升高。 2.病理性升高: (1)骨骼疾病如佝僂病、軟骨病、骨惡性腫瘤、惡性腫瘤骨轉移等; (2)肝膽疾病如肝外膽道阻塞、肝癌、肝硬化、毛細膽管性肝炎等; (3)其他疾病如甲狀旁腺機能亢進。 3.病理性降低:見於重症慢性腎炎、兒童甲狀腺機能不全、貧血等。

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