紫外—可見分光光度分析法

一、基本要求

掌握：本章要求掌握分光光度法的特點、基本原理、測定方法及計算方法；分子吸收光譜與電子躍遷型別，物質對光的選擇吸收與吸收光譜曲線，摩爾吸收係數與吸收係數，吸光度與透光度，偏離朗伯-比爾定律的原因；掌握顯色反應條件及光度測量條件的選擇；掌握紫外—可見分光光度計的主要部件，各部件的作用及儀器原理，主要型別及特點；掌握差示分光光度法的原理、特點。

理解：物質分子結構與紫外吸收光譜的關係，吸收波長位移與分子結構變化的關係；紫外—可見分光光度定量分析影響結果準確度的各種因素。

瞭解：瞭解紫外—可見分光光度法測定靈敏度和選擇性的途徑；雙波長分光光度法等其它分光光度法定量測定的方法；紫外—可見分光光度法在有機化合物的結構解析方面的作用及在其他方面的應用。

二、 基本概念與重點內容

A概述

1．紫外—可見分光光度法的特點

靈敏度與準確度較高；選擇性較好；裝置簡單、操作簡便。

2．分光光度法的發展過程

目視比色法 光電比色法 分光光度法

3． 分子的紫外—可見吸收光譜

分子的紫外—可見吸收光譜是基於物質分子吸收紫外輻射或可見光，其外層電子躍遷而成，又稱分子的電子躍遷光譜。紫外—可見分光光度法是基於物質分子的紫外—可見吸收光譜而建立的一種定性、定量分析方法。

4． 光的基本性質

5．物質對光的吸收及吸收光譜

6．紫外—可見吸收光譜與電子躍遷型別

7．生色團與助色團

B 光的吸收定律

1．光吸收的基本定律（朗伯-比爾定律）

2．吸光度與透光率、百分透光率之間的關係

3．工作曲線的繪製與應用

4．吸光係數、摩爾吸光係數和桑德爾靈敏度

5． 偏離朗伯-比爾定律的因素

C紫外-可見分光光度計

1． 分光光度計的主要部件

2． 在紫外和可見光區進行測量時，分別選擇何種光源

3． 單色器的主要元件

光柵；稜鏡

4． 分光光度計中的檢測器型別

早期：光電池；光電管；光電倍增管。

5．紫外-可見分光光度計的型別及特點

D顯色測定試樣的製備和光度測定條件的選擇

、

1．顯色反應及其影響因素

2．測定讀數誤差和測定條件的選擇

5．入射波長的選擇

E 分光光度定量測定方法與其他應用

1．單組分的測定

通常採用 A-C 標準曲線法定量測定。

2.多組分的同時測定

3．紫外可見吸收光譜在有機化合物結構解析中的作用

瞭解共軛程度、空間效應、氫鍵等；可對飽和與不飽和化合物、異構體及構象進行判別。在有機化合物結構解析中，紫外可見吸收光譜沒有紅外吸收光譜提供的結構資訊多。

4．紫外—可見吸收光譜中有機物髮色體系資訊分析的一般規律