原理:蛋白質透過鹽析的辦法沉澱的原理是降低蛋白質的溶解度,使蛋白質凝聚而從溶液中析出。蛋白質分子聚集而從溶液中析出的現象,稱為蛋白質的沉澱。由於水化層和雙電層的存在,蛋白質溶液是一種穩定的膠體溶液。如果向蛋白質溶液中加入某種電解質,以破壞其顆粒表面的雙電層或調節溶液的pH,使其達到等電點,蛋白質顆粒因失去電荷變得不穩定而將沉澱析出。蛋白沉澱法是毒物分析過程中對生物樣品進行前處理的一種常用方式。對於富 含蛋白質的檢材,在進行分離、提取時要將 大量干擾測定的蛋白質沉澱除去,使待測毒 物仍留存於溶液中。操作時一般要先將檢材組織磨碎,然後再加入蛋白沉澱劑進行蛋白質沉澱,組織中的蛋白質與沉澱劑形成疏鬆的絮狀沉澱物,而毒物則留在溶液中。擴充套件資料:有機溶劑易使蛋白質或酶變性,常採用降低溫度的方法進行有效控制, 而且有機溶劑使用量大,溶劑的使用及回收;儲存都比較困難或 麻煩。 鹽析法:鹽析法簡單方便,可用於蛋白質抗原的粗提、丙種 球蛋白的提取、蛋白質的濃縮等。鹽析法提純的抗原濃度不高,只用於抗原的初步純化。 金屬離子沉澱法純度高,太耗電,沉澱效果很好,容易使生物分 子變性,複合物難分解。選澤性變性沉澱法:溶解度下降、粘度 增加、紫外線吸收增加、側鏈反應增強、對酶的作用敏感,易被 水解 (這就是為何蛋白類食品在被加熱至變性後人體對其中氨基 酸的吸收。能力增強) 等電點沉澱法無機酸會引起較大的蛋白質不可逆變性的危險等電點裝置複雜,也比較純。蛋白質變性指在某些物理和化學因素如熱、有機溶劑、重金屬離子、生物鹼試劑等作用下,蛋白質特定的空間構象被破壞,也即有序的空間結構變成無序的空間結構,從而導致其理化性質改變和生物活性的喪失。
原理:蛋白質透過鹽析的辦法沉澱的原理是降低蛋白質的溶解度,使蛋白質凝聚而從溶液中析出。蛋白質分子聚集而從溶液中析出的現象,稱為蛋白質的沉澱。由於水化層和雙電層的存在,蛋白質溶液是一種穩定的膠體溶液。如果向蛋白質溶液中加入某種電解質,以破壞其顆粒表面的雙電層或調節溶液的pH,使其達到等電點,蛋白質顆粒因失去電荷變得不穩定而將沉澱析出。蛋白沉澱法是毒物分析過程中對生物樣品進行前處理的一種常用方式。對於富 含蛋白質的檢材,在進行分離、提取時要將 大量干擾測定的蛋白質沉澱除去,使待測毒 物仍留存於溶液中。操作時一般要先將檢材組織磨碎,然後再加入蛋白沉澱劑進行蛋白質沉澱,組織中的蛋白質與沉澱劑形成疏鬆的絮狀沉澱物,而毒物則留在溶液中。擴充套件資料:有機溶劑易使蛋白質或酶變性,常採用降低溫度的方法進行有效控制, 而且有機溶劑使用量大,溶劑的使用及回收;儲存都比較困難或 麻煩。 鹽析法:鹽析法簡單方便,可用於蛋白質抗原的粗提、丙種 球蛋白的提取、蛋白質的濃縮等。鹽析法提純的抗原濃度不高,只用於抗原的初步純化。 金屬離子沉澱法純度高,太耗電,沉澱效果很好,容易使生物分 子變性,複合物難分解。選澤性變性沉澱法:溶解度下降、粘度 增加、紫外線吸收增加、側鏈反應增強、對酶的作用敏感,易被 水解 (這就是為何蛋白類食品在被加熱至變性後人體對其中氨基 酸的吸收。能力增強) 等電點沉澱法無機酸會引起較大的蛋白質不可逆變性的危險等電點裝置複雜,也比較純。蛋白質變性指在某些物理和化學因素如熱、有機溶劑、重金屬離子、生物鹼試劑等作用下,蛋白質特定的空間構象被破壞,也即有序的空間結構變成無序的空間結構,從而導致其理化性質改變和生物活性的喪失。