蛋白質在聚丙烯醯胺凝膠中電泳時，它的遷移取決於它所帶電荷以及分子大小和形狀等因素。1967年Shapiro等人發現，如果在聚丙烯醯胺系統中加入陰離子去汙劑十二烷基磺酸鈉（SDS），大多數蛋白質能與SDS按一定比例結合，即每克蛋白質結合1.4g的SDS－複合物都帶上相同密度的負電荷，它的量大大超過了蛋白質分子原有的電荷量，因而消除了蛋白質原有的電荷差別，使蛋白質分子電泳的遷移率主要取決於本身的分子量，而與蛋白質所帶的電荷無關，在一定條件下，蛋白質的分子量的對數與電泳遷移率間呈負相關。
操作步驟
1、凝膠製備：
用兩塊電泳玻璃板製成垂直板槽（不能漏膠），垂直放置。將配製好的分離膠溶液倒入，滴加入無離子水，待凝膠聚集後，倒出無離子水，用吸水紙吸乾，倒入濃縮膠，再插入梳子。
2、上樣：
分別取樣品若干ml於離心管中，按1/1～1/5比例加入5×樣品緩衝液，再沸水浴中加熱3～5min，取出待用。用微量注射器分別吸取不超過30μl不同濃度的標準蛋白樣品和試驗樣品注入樣品槽。點樣結束後，調節電泳儀電流到10mA（2～3mA/em），保持電流穩定不變，當溴酚藍遷移到離分離膠底1～2cm時，即可停止電泳。
3、染色：
電泳完畢後，取出凝膠板，浸入染色液中，在37℃溫箱中保溫過夜。倒掉染色液，24h後，即可看到清晰的蛋白質條帶。
蛋白質在聚丙烯醯胺凝膠中電泳時，它的遷移取決於它所帶電荷以及分子大小和形狀等因素。1967年Shapiro等人發現，如果在聚丙烯醯胺系統中加入陰離子去汙劑十二烷基磺酸鈉（SDS），大多數蛋白質能與SDS按一定比例結合，即每克蛋白質結合1.4g的SDS－複合物都帶上相同密度的負電荷，它的量大大超過了蛋白質分子原有的電荷量，因而消除了蛋白質原有的電荷差別，使蛋白質分子電泳的遷移率主要取決於本身的分子量，而與蛋白質所帶的電荷無關，在一定條件下，蛋白質的分子量的對數與電泳遷移率間呈負相關。
操作步驟
1、凝膠製備：
用兩塊電泳玻璃板製成垂直板槽（不能漏膠），垂直放置。將配製好的分離膠溶液倒入，滴加入無離子水，待凝膠聚集後，倒出無離子水，用吸水紙吸乾，倒入濃縮膠，再插入梳子。
2、上樣：
分別取樣品若干ml於離心管中，按1/1～1/5比例加入5×樣品緩衝液，再沸水浴中加熱3～5min，取出待用。用微量注射器分別吸取不超過30μl不同濃度的標準蛋白樣品和試驗樣品注入樣品槽。點樣結束後，調節電泳儀電流到10mA（2～3mA/em），保持電流穩定不變，當溴酚藍遷移到離分離膠底1～2cm時，即可停止電泳。
3、染色：
電泳完畢後，取出凝膠板，浸入染色液中，在37℃溫箱中保溫過夜。倒掉染色液，24h後，即可看到清晰的蛋白質條帶。