液體培養基是培養基物理分類一種,是相對固體培養基而言的,是微生物或動植物細胞的液狀培養基。在液體培養基中的培養稱為液中培養、液體培養或液內培養。培養基由於配製的原料不同,使用要求不同,而貯存保管方面也稍有不同。一般培養基在受熱、吸潮後,易被細菌汙染或分解變質,因此一般培養基必須防潮、避光、陰涼處儲存。對一些需嚴格滅菌的培養基(如組織培養基),較長時間的貯存,必須放在3~6℃的冰箱內。
二、培養基的配製
1.配料
配方換算→在容器中加入少量水〔蒸餾水,自然水〕→按照配方稱取各種藥品〔依次加入〕→加足所需水量《一藥一勺,取藥後立即蓋上瓶蓋》。
2.溶解
澱粉溶解:少量冷水調成糊狀加熱溶解,特別是加有瓊脂的培養基,一定要煮沸,瓊脂的熔解溫度95~97℃ ,且需要邊加熱邊攪拌以防止燒焦。
3.調PH
用1N的鹽酸或的1N NaOH把培養基調節到所要求的值。
4.過濾
濾紙或棉花進行過濾。
5.分裝
一般培養基放在三角瓶或試管中滅菌使用。
⑴三角瓶
若作靜置培養,則100 ml培養基/250 ml的三角瓶,最多不能超過150 ml培養基/250 ml的三角瓶,否則滅菌時培養基沸騰容易汙染棉塞,造成染菌;若作搖瓶培養,則15~20 ml培養基/250ml的三角瓶,保證通氣良好。
⑵試管分裝
液體培養基一般裝4~5 ml,約試管的1/4高度;固體斜面培養基一般裝3~4 ml,約試管的1/5高度。
6.包紮
分裝好後,塞上棉塞,在用牛皮紙將棉塞包裹好,防止滅菌時水份進入把棉塞弄溼。
7.滅菌
按配方上要求的溫度、壓力進行高壓蒸汽滅菌。如果滅菌的溫度太高,營養成分會被破壞,培養基中的糖、氨基酸會使培養基的顏色變深。
8.擺斜面
滅菌後需要擺斜面的試管要趁熱斜著擺放,使其凝固成為一個斜面,約佔試管長度的1/2。
9.貯存
培養基在30℃下放置一天,無汙染的即可使用。一般用牛皮紙包裹好存放於2-8℃冰箱中備用。
液體培養基是培養基物理分類一種,是相對固體培養基而言的,是微生物或動植物細胞的液狀培養基。在液體培養基中的培養稱為液中培養、液體培養或液內培養。培養基由於配製的原料不同,使用要求不同,而貯存保管方面也稍有不同。一般培養基在受熱、吸潮後,易被細菌汙染或分解變質,因此一般培養基必須防潮、避光、陰涼處儲存。對一些需嚴格滅菌的培養基(如組織培養基),較長時間的貯存,必須放在3~6℃的冰箱內。
二、培養基的配製
1.配料
配方換算→在容器中加入少量水〔蒸餾水,自然水〕→按照配方稱取各種藥品〔依次加入〕→加足所需水量《一藥一勺,取藥後立即蓋上瓶蓋》。
2.溶解
澱粉溶解:少量冷水調成糊狀加熱溶解,特別是加有瓊脂的培養基,一定要煮沸,瓊脂的熔解溫度95~97℃ ,且需要邊加熱邊攪拌以防止燒焦。
3.調PH
用1N的鹽酸或的1N NaOH把培養基調節到所要求的值。
4.過濾
濾紙或棉花進行過濾。
5.分裝
一般培養基放在三角瓶或試管中滅菌使用。
⑴三角瓶
若作靜置培養,則100 ml培養基/250 ml的三角瓶,最多不能超過150 ml培養基/250 ml的三角瓶,否則滅菌時培養基沸騰容易汙染棉塞,造成染菌;若作搖瓶培養,則15~20 ml培養基/250ml的三角瓶,保證通氣良好。
⑵試管分裝
液體培養基一般裝4~5 ml,約試管的1/4高度;固體斜面培養基一般裝3~4 ml,約試管的1/5高度。
6.包紮
分裝好後,塞上棉塞,在用牛皮紙將棉塞包裹好,防止滅菌時水份進入把棉塞弄溼。
7.滅菌
按配方上要求的溫度、壓力進行高壓蒸汽滅菌。如果滅菌的溫度太高,營養成分會被破壞,培養基中的糖、氨基酸會使培養基的顏色變深。
8.擺斜面
滅菌後需要擺斜面的試管要趁熱斜著擺放,使其凝固成為一個斜面,約佔試管長度的1/2。
9.貯存
培養基在30℃下放置一天,無汙染的即可使用。一般用牛皮紙包裹好存放於2-8℃冰箱中備用。