一、醫院消毒滅菌效果監測：
1.必要性：
①消毒滅菌效果監測方法專業性強，不檢驗不知道結果；
②新建病房、新消毒裝置、新消毒劑均應做效果監測。
2.科學性：以科學的試驗設計、熟練的技術、可靠的結果、確切地分析，得出結果評價。
3.規範性：以權威規範為依據，符合其基本原則要求。如檢測時機的確定、標準菌株的選擇、標本數、重複次數、實驗方法等確立。
二、監測方法的分類：
1、根據檢測方法性質分：
①物理方法：測量壓力滅菌溫度、測量紫外線強度等；
②化學方法：各種化學指示卡；
2、根據消毒滅菌物件性質分：
①空氣消毒：
②表面消毒：
3.根據具體消毒物件分：
①壓力蒸汽滅菌：
②各種器械：
④紫外線燈殺菌效果：
⑤手和面板消毒效果：
⑥空氣消毒效果：
⑦物體表面消毒效果：
三、必要條件：
1、專業實驗室：
2、必備裝置器材：
3、選擇實驗方法：
4、熟練實驗技術：
四、衛生部對500張床位以上醫院感染管理的質量指標規定：
（1）醫院感染率≤10%；滅菌切口感染 ≤0.5%
（2）醫院感染的漏報率≤20%；
調查樣本量不少於年監測病人數的10%
（3）醫院必須對消毒、滅菌效果定期進行監測。
滅菌合格率必須達到100%
（4）使用中的消毒劑、滅菌劑應進行生物和化學監測。消毒劑每季度生物監測1次，細菌含量必須<100cfu/ml，不得檢出致病微生物；滅菌劑每月檢測1次，不得檢出微生物。化學監測應根據消毒、滅菌劑的效能定期監測。
（5）壓力蒸氣滅菌進行工藝、化學和生物監測。環氧乙烷必須每鍋進行工藝監測，每包進行化學監測，每月進行生物監測。壓力蒸氣鍋每天第一鍋必須做B-D試驗。
（6）紫外線燈強度監測：每季度1次；新燈管30W≥90µW/cm2,舊燈管≥70µW/cm2
（7）胃腸鏡等診療器材消毒標準不得檢出致病微生物；腹腔鏡、關節鏡等應滅菌處理，不得檢出任何微生物。
（8）進入人體組織、血液、器官的醫療用品應滅菌處理，不得檢出致病微生物；接觸黏膜醫療用品細菌總數≤20cfu/g（或100 cm2）；接觸面板的醫療用品細菌總數≤200cfu/g（或100 cm2），不得檢出致病微生物。
（9）母嬰同室、嬰兒室物體表面和醫護人員手不得檢出沙門氏菌。
（10）醫院各類環境空氣、物體表面、醫護人員手細菌數標準：
環境 類 別 空氣 物體表面 醫護人員手
cfu/cm3 cfu/cm2 cfu/cm2
Ⅰ類 層流潔淨手術室、 ≤10 ≤5 ≤5
潔淨病房
Ⅱ類 普通手術室、產房、 ≤200 ≤5 ≤5
嬰兒室、普通隔離病房
Ⅲ類 兒科、婦科檢查室、 ≤500 ≤10 ≤10
注射、換藥、治療、
急診、化驗、普通病房
Ⅳ類 傳染病科及病房 —— ≤15 ≤15
五、為保證醫院消毒滅菌可靠，應認真做好醫院消毒滅菌效果監測
1、影響消毒滅菌因素很多，使消毒滅菌效果難以保證。
2、消毒滅菌效果生物監測專業性強，條件難創造，結果評價難度大，實驗週期長。
3、化學測試試劑法較複雜，結果準確；試紙法簡便易行，但精確度較差。
六、壓力蒸汽滅菌效果的監測：
（一）BD試紙：
檢查滅菌器工藝狀態，並不能反應滅菌器使用中被滅菌物品的實際滅菌效果。發現陽性應進行滅菌器效能檢查除錯。
（二）指示膠帶：
表示是否經過滅菌處理，並不能反應被滅菌物品實際滅菌效果。
（三）化學指示卡：
檢測每包被滅菌物品的滅菌效果。建議最好每包被滅菌物品中心放一片化學指示卡,待滅菌處理後,視其變色程度（滅菌效果）決定是否使用。
（四）用生物指示劑作系統監測：
採用生物滅菌指示劑來檢查壓力蒸汽滅菌效果是最科學、最可靠的監測方法。由中國預防醫學科學院流行病微生物研究所，北京鑫四環消毒技術開發中心聯合產銷的嗜熱脂肪桿菌芽孢（SS1，K31）是國際公認的標準菌株。現製成標準菌片，供檢查壓力蒸汽滅菌效果檢測。
w 菌株特點：
1、 該菌為需氧芽孢桿菌，細菌繁殖體G蘭氏染色陰性呈紫色，細菌芽胞孔雀綠著色。其細菌繁殖體對培養基要求低，在溴甲酚紫葡萄糖蛋白腖瓊脂上生長良好，表面粗糙呈米黃色。
2、最適生長繁殖溫度為56–65℃，培養24h即可形成菌落，37℃下24h看不到菌落。
3、 本生物指示劑載體為高階濾紙片，染菌量為5×105–106cfu/片，封裝在小紙袋內，熱死亡時間為121℃，3.9min陽性，19min陰性；D10值1.3–1.9min，符合美國藥典第十一版規定標準。該菌無毒，熱抗穩定，在冰箱內4℃下儲存一年抗力無明顯下降，在常溫（20℃左右）可儲存1個月。
w 使用方法：
1、 該芽孢菌片使用時將裝有菌片的小紙袋放在被滅菌的物品中心部位（每鍋放置菌片數按衛生部規定）。
2、 滅菌後，再無菌操作下取出小紙袋中的菌片， 投放到溴甲酚紫培養液管中。同時將未經滅菌的菌片投入另一管培養基中作對照。
3、 56℃–60℃培養，48h觀察結果，對照管為米黃色；若滅菌後菌片培養液顏色不變仍為淡紫色，為陰性（–），表示滅菌徹底；如變黃為陽性（+），表示滅菌不徹底。
w 培養基成分和配製方法：
1、成分：胰蛋白腖10g、葡萄糖5g、蒸餾水 1000ml、1.6%溴甲酚紫酒精溶液指示劑1ml。
2、配製方法：
（1）1.6g溴甲酚紫溶於98.4ml的96%酒精溶液中搖勻；
（2）把前三種成分溶解後，調解pH7.0-7.2，加入指示劑搖勻；
（3）每管分裝5ml，以121℃20min滅菌後，放4℃冰箱內儲存，備用。
w 注意事項：
1、防止指示劑中酒精揮發而使溴甲酚紫含量過高（溴甲酚紫含量過高後可抑菌生長）；
2、菌片滅菌後應及時取出培養；
3、禁止菌片接觸任何消毒劑及放射源以免影響抗力。
七、化學消毒劑消毒效果監測：
（一）消毒劑有效含量的測試：
1、主要是有效含量不穩定的消毒劑，如過氧 乙酸、含氯消毒劑等應進行含量測試。
2、 化學試劑滴定法較複雜但結果精確；試紙法方便快速，但準確性差。專用測氯試紙——比較準確；複合測試試紙（可同測過氧乙酸、含氯消毒劑）——準確性較差。戊二醛試紙；含碘、臭氧等試紙尚待研究。
（二）化學消毒劑使用溶液汙染菌數的檢測
1、選好用好中和劑：
2、做到：對應，濃度、比例合適
3、 中和劑選擇原則：
①本身對菌無影響
②確能去除殺菌因子
④對照完全
① 菌液+藥液 培養
②（藥+菌液）+中和劑 培養
④（藥+中和劑）+菌液 培養
⑤ PBS+菌液 培養
⑥ PBS 培養
⑦ 中和劑 培養
一、醫院消毒滅菌效果監測：
1.必要性：
①消毒滅菌效果監測方法專業性強，不檢驗不知道結果；
②新建病房、新消毒裝置、新消毒劑均應做效果監測。
2.科學性：以科學的試驗設計、熟練的技術、可靠的結果、確切地分析，得出結果評價。
3.規範性：以權威規範為依據，符合其基本原則要求。如檢測時機的確定、標準菌株的選擇、標本數、重複次數、實驗方法等確立。
二、監測方法的分類：
1、根據檢測方法性質分：
①物理方法：測量壓力滅菌溫度、測量紫外線強度等；
②化學方法：各種化學指示卡；
2、根據消毒滅菌物件性質分：
①空氣消毒：
②表面消毒：
3.根據具體消毒物件分：
①壓力蒸汽滅菌：
②各種器械：
④紫外線燈殺菌效果：
⑤手和面板消毒效果：
⑥空氣消毒效果：
⑦物體表面消毒效果：
三、必要條件：
1、專業實驗室：
2、必備裝置器材：
3、選擇實驗方法：
4、熟練實驗技術：
四、衛生部對500張床位以上醫院感染管理的質量指標規定：
（1）醫院感染率≤10%；滅菌切口感染 ≤0.5%
（2）醫院感染的漏報率≤20%；
調查樣本量不少於年監測病人數的10%
（3）醫院必須對消毒、滅菌效果定期進行監測。
滅菌合格率必須達到100%
（4）使用中的消毒劑、滅菌劑應進行生物和化學監測。消毒劑每季度生物監測1次，細菌含量必須<100cfu/ml，不得檢出致病微生物；滅菌劑每月檢測1次，不得檢出微生物。化學監測應根據消毒、滅菌劑的效能定期監測。
（5）壓力蒸氣滅菌進行工藝、化學和生物監測。環氧乙烷必須每鍋進行工藝監測，每包進行化學監測，每月進行生物監測。壓力蒸氣鍋每天第一鍋必須做B-D試驗。
（6）紫外線燈強度監測：每季度1次；新燈管30W≥90µW/cm2,舊燈管≥70µW/cm2
（7）胃腸鏡等診療器材消毒標準不得檢出致病微生物；腹腔鏡、關節鏡等應滅菌處理，不得檢出任何微生物。
（8）進入人體組織、血液、器官的醫療用品應滅菌處理，不得檢出致病微生物；接觸黏膜醫療用品細菌總數≤20cfu/g（或100 cm2）；接觸面板的醫療用品細菌總數≤200cfu/g（或100 cm2），不得檢出致病微生物。
（9）母嬰同室、嬰兒室物體表面和醫護人員手不得檢出沙門氏菌。
（10）醫院各類環境空氣、物體表面、醫護人員手細菌數標準：
環境 類 別 空氣 物體表面 醫護人員手
cfu/cm3 cfu/cm2 cfu/cm2
Ⅰ類 層流潔淨手術室、 ≤10 ≤5 ≤5
潔淨病房
Ⅱ類 普通手術室、產房、 ≤200 ≤5 ≤5
嬰兒室、普通隔離病房
Ⅲ類 兒科、婦科檢查室、 ≤500 ≤10 ≤10
注射、換藥、治療、
急診、化驗、普通病房
Ⅳ類 傳染病科及病房 —— ≤15 ≤15
五、為保證醫院消毒滅菌可靠，應認真做好醫院消毒滅菌效果監測
1、影響消毒滅菌因素很多，使消毒滅菌效果難以保證。
2、消毒滅菌效果生物監測專業性強，條件難創造，結果評價難度大，實驗週期長。
3、化學測試試劑法較複雜，結果準確；試紙法簡便易行，但精確度較差。
六、壓力蒸汽滅菌效果的監測：
（一）BD試紙：
檢查滅菌器工藝狀態，並不能反應滅菌器使用中被滅菌物品的實際滅菌效果。發現陽性應進行滅菌器效能檢查除錯。
（二）指示膠帶：
表示是否經過滅菌處理，並不能反應被滅菌物品實際滅菌效果。
（三）化學指示卡：
檢測每包被滅菌物品的滅菌效果。建議最好每包被滅菌物品中心放一片化學指示卡,待滅菌處理後,視其變色程度（滅菌效果）決定是否使用。
（四）用生物指示劑作系統監測：
採用生物滅菌指示劑來檢查壓力蒸汽滅菌效果是最科學、最可靠的監測方法。由中國預防醫學科學院流行病微生物研究所，北京鑫四環消毒技術開發中心聯合產銷的嗜熱脂肪桿菌芽孢（SS1，K31）是國際公認的標準菌株。現製成標準菌片，供檢查壓力蒸汽滅菌效果檢測。
w 菌株特點：
1、 該菌為需氧芽孢桿菌，細菌繁殖體G蘭氏染色陰性呈紫色，細菌芽胞孔雀綠著色。其細菌繁殖體對培養基要求低，在溴甲酚紫葡萄糖蛋白腖瓊脂上生長良好，表面粗糙呈米黃色。
2、最適生長繁殖溫度為56–65℃，培養24h即可形成菌落，37℃下24h看不到菌落。
3、 本生物指示劑載體為高階濾紙片，染菌量為5×105–106cfu/片，封裝在小紙袋內，熱死亡時間為121℃，3.9min陽性，19min陰性；D10值1.3–1.9min，符合美國藥典第十一版規定標準。該菌無毒，熱抗穩定，在冰箱內4℃下儲存一年抗力無明顯下降，在常溫（20℃左右）可儲存1個月。
w 使用方法：
1、 該芽孢菌片使用時將裝有菌片的小紙袋放在被滅菌的物品中心部位（每鍋放置菌片數按衛生部規定）。
2、 滅菌後，再無菌操作下取出小紙袋中的菌片， 投放到溴甲酚紫培養液管中。同時將未經滅菌的菌片投入另一管培養基中作對照。
3、 56℃–60℃培養，48h觀察結果，對照管為米黃色；若滅菌後菌片培養液顏色不變仍為淡紫色，為陰性（–），表示滅菌徹底；如變黃為陽性（+），表示滅菌不徹底。
w 培養基成分和配製方法：
1、成分：胰蛋白腖10g、葡萄糖5g、蒸餾水 1000ml、1.6%溴甲酚紫酒精溶液指示劑1ml。
2、配製方法：
（1）1.6g溴甲酚紫溶於98.4ml的96%酒精溶液中搖勻；
（2）把前三種成分溶解後，調解pH7.0-7.2，加入指示劑搖勻；
（3）每管分裝5ml，以121℃20min滅菌後，放4℃冰箱內儲存，備用。
w 注意事項：
1、防止指示劑中酒精揮發而使溴甲酚紫含量過高（溴甲酚紫含量過高後可抑菌生長）；
2、菌片滅菌後應及時取出培養；
3、禁止菌片接觸任何消毒劑及放射源以免影響抗力。
七、化學消毒劑消毒效果監測：
（一）消毒劑有效含量的測試：
1、主要是有效含量不穩定的消毒劑，如過氧 乙酸、含氯消毒劑等應進行含量測試。
2、 化學試劑滴定法較複雜但結果精確；試紙法方便快速，但準確性差。專用測氯試紙——比較準確；複合測試試紙（可同測過氧乙酸、含氯消毒劑）——準確性較差。戊二醛試紙；含碘、臭氧等試紙尚待研究。
（二）化學消毒劑使用溶液汙染菌數的檢測
1、選好用好中和劑：
2、做到：對應，濃度、比例合適
3、 中和劑選擇原則：
①本身對菌無影響
②確能去除殺菌因子
④對照完全
① 菌液+藥液 培養
②（藥+菌液）+中和劑 培養
④（藥+中和劑）+菌液 培養
⑤ PBS+菌液 培養
⑥ PBS 培養
⑦ 中和劑 培養