Western blot的操作流程中大部分都用到TBST洗液，而且還是封閉，一抗二抗孵育這種比較關鍵的步驟。通常Tween-20作為一種非離子型表面活性劑，效果和SDS、BSA作用差不多。由於膜上結合的蛋白會因為一些去汙劑而被代替，因此在封閉時可使用Tween20清除去汙劑，而且濃度不要超過0.3%（0.05%效果最好），如果牛奶封閉效果不好可以提高吐溫濃度。在WB洗液裡的吐溫是和BSA一樣，對抗原抗體蛋白提供保護作用，同時因為是表面活性劑（司盤加成親水的環氧乙烷基團後的化合物），可以減少抗體對抗原的非特異性作用，用於洗脫未結合的抗體、減少非特異性結合。Tween-20是我們用TBST的時候Tween-20得用量是0.5ml/L，不加SDS。
Tween-20
Tween-20也寫作Tween 20，也稱Polyethylene glycol sorbitan monolaurate，中文名為吐溫-20或吐溫20。Tween-20為黃色或琥珀色澄明的油狀液體，具有特殊的臭氣和微弱苦味。分子中含有較多的親水性基團，可與水、甲醇、乙醇、異丙醇、丙二醇、乙二醇、棉子油等混溶。是常用的非離子性去垢劑。
Tween-20的應用
Tween-20是一種非離子型表面活性劑。用途為水包油乳化劑、可用作溶劑、擴散劑、穩定劑、潤滑劑和抗靜電劑等。氣相色譜固定液(最高使用溫度120℃)分離分析揮發油、脂肪酸酯、醇、酮和鹵化物。
Tween-20在Western blot 中的作用？
Western blot的操作流程中大部分都用到TBST洗液，而且還是封閉，一抗二抗孵育這種比較關鍵的步驟。通常Tween-20作為一種非離子型表面活性劑，效果和SDS、BSA作用差不多。由於膜上結合的蛋白會因為一些去汙劑而被代替，因此在封閉時可使用Tween20清除去汙劑，而且濃度不要超過0.3%（0.05%效果最好），如果牛奶封閉效果不好可以提高吐溫濃度。在WB洗液裡的吐溫是和BSA一樣，對抗原抗體蛋白提供保護作用，同時因為是表面活性劑（司盤加成親水的環氧乙烷基團後的化合物），可以減少抗體對抗原的非特異性作用，用於洗脫未結合的抗體、減少非特異性結合。Tween-20是我們用TBST的時候Tween-20得用量是0.5ml/L，不加SDS。