鼠傷寒沙門氏菌（Salmonella typhimurium）的組氨酸營養缺陷型（his－）菌株，在含微量組氨酸的培養基中，除極少數自發回覆突變的細胞外，一般只能分裂幾次，形成在顯微鏡下才能見到的微菌落。受誘變劑作用後，大量細胞發生回覆突變，自行合成組氨酸，發育成肉眼可見的菌落。某些化學物質需經代謝活化才有致變作用，在測試系統中加入哺乳動物微粒體酶①，可彌補體外試驗缺乏代謝活化系統之不足。鑑於化學物質的致突變作用與致癌作用之間密切相關，故此法現廣泛應用於致癌物的篩選。
編輯本段步驟和方法
Ames試驗的常規方法有斑點試驗和平板摻入試驗。 1．菌株鑑定 用於測試的菌株，需經基因型和生物學性狀鑑定，符合要求才能投入使用。 目前推薦使用的一套菌株是TA97、TA98、TA100和TA102。鑑定前先進行增菌培養。為鑑定結果可靠，需同時培養野生型TV菌株，作為測試菌基因型之對照。增菌培養用牛肉膏蛋白腖液體培養基，接種後於37℃，100r／min振盪培養12h左右，細菌生長相為對數期末，含菌數應為1×109個／ml～2×109個／ml。 鑑定專案： （1）脂多糖屏障丟失（rfa）用接種環或一端撓起的接種針以無菌操作術取各菌株的增菌培養液，在營養瓊脂平板上分別劃平行線，然後用滅菌尖頭鑷夾取滅菌濾紙條，浸溼結晶紫溶液，貼放在平板上與各接種平行線垂直相交。蓋好皿蓋後倒置於37t溫箱，培養24h後觀察結果。 （2）R因子 劃線接種，貼放濾紙條及培養等均同上，唯濾紙條浸溼的藥液不同，為氨苄青黴素鈉溶液。TA102除pKM101外，還有pAQ1，載有抗四環素的基因，故另用濾紙條浸溼四環素溶液後貼放於劃線接種的平板上。 （3）紫外線損傷修復缺陷（△uvrB）在營養瓊脂平板上按上述方法劃線接種後，一半接種線用黑玻璃遮蓋，另一半暴露於紫外光下8sec，然後蓋好皿蓋並用黑紙包裹平皿，防止可見光修復作用。培養同上。 （4）自發回變 預先製備底平板；向滅菌並在水浴內保溫45℃的上層軟瓊脂中注入0.1ml菌液；混勻後傾於底平板上並鋪平。平皿倒置於37℃溫箱培養48h。 （5）回變特性——診斷性試驗 上層軟瓊脂中除菌液外，還注入已知陽性物之溶液，需活化系統者並加入S9mix，餘同上。 組氨酸營養缺陷型由自發回變即可知。 2．斑點試驗 吸取測試菌增菌培養後的菌液0.1ml，注入融化並保溫45℃左右的上層軟瓊脂中，需S9活化的再加0.3ml－0.4mlS9mix，立即混勻，傾於底平板上，鋪平冷凝。用滅菌尖頭鑷夾滅菌圓濾紙片邊緣，紙片浸溼受試物溶液，或直接取固態受試物，貼放於上層培養基的表面。同時做溶劑對照和陽性對照，分別貼放於平板上相應位置。平皿倒置於37℃溫箱培養48h。在紙片外圍長出密集菌落圈，為陽性；菌落散佈，密度與自發回變相似，為陰性。 3．平板摻入試驗 將一定量樣液和0.1ml測試菌液均加入上層軟瓊脂中，需代謝活化的再加0.3ml－0.4ml S9mix，混勻後迅速傾於底平板上鋪平冷凝。同時做陰性和陽性對照，每種處理做3個平行。試樣通常設4個～5個劑量。選擇劑量範圍開始應大些，有陽性或可疑陽性結果時，再在較窄的劑量範圍內確定劑量反應關係。培養同上。同一劑量各皿回變菌落均數與各陰性對照皿自發回變菌落均數之比，為致變比（MR）。MR值≥2，且有劑量-反應關係，背景正常，則判為致突變陽性。
鼠傷寒沙門氏菌（Salmonella typhimurium）的組氨酸營養缺陷型（his－）菌株，在含微量組氨酸的培養基中，除極少數自發回覆突變的細胞外，一般只能分裂幾次，形成在顯微鏡下才能見到的微菌落。受誘變劑作用後，大量細胞發生回覆突變，自行合成組氨酸，發育成肉眼可見的菌落。某些化學物質需經代謝活化才有致變作用，在測試系統中加入哺乳動物微粒體酶①，可彌補體外試驗缺乏代謝活化系統之不足。鑑於化學物質的致突變作用與致癌作用之間密切相關，故此法現廣泛應用於致癌物的篩選。
編輯本段步驟和方法
Ames試驗的常規方法有斑點試驗和平板摻入試驗。 1．菌株鑑定 用於測試的菌株，需經基因型和生物學性狀鑑定，符合要求才能投入使用。 目前推薦使用的一套菌株是TA97、TA98、TA100和TA102。鑑定前先進行增菌培養。為鑑定結果可靠，需同時培養野生型TV菌株，作為測試菌基因型之對照。增菌培養用牛肉膏蛋白腖液體培養基，接種後於37℃，100r／min振盪培養12h左右，細菌生長相為對數期末，含菌數應為1×109個／ml～2×109個／ml。 鑑定專案： （1）脂多糖屏障丟失（rfa）用接種環或一端撓起的接種針以無菌操作術取各菌株的增菌培養液，在營養瓊脂平板上分別劃平行線，然後用滅菌尖頭鑷夾取滅菌濾紙條，浸溼結晶紫溶液，貼放在平板上與各接種平行線垂直相交。蓋好皿蓋後倒置於37t溫箱，培養24h後觀察結果。 （2）R因子 劃線接種，貼放濾紙條及培養等均同上，唯濾紙條浸溼的藥液不同，為氨苄青黴素鈉溶液。TA102除pKM101外，還有pAQ1，載有抗四環素的基因，故另用濾紙條浸溼四環素溶液後貼放於劃線接種的平板上。 （3）紫外線損傷修復缺陷（△uvrB）在營養瓊脂平板上按上述方法劃線接種後，一半接種線用黑玻璃遮蓋，另一半暴露於紫外光下8sec，然後蓋好皿蓋並用黑紙包裹平皿，防止可見光修復作用。培養同上。 （4）自發回變 預先製備底平板；向滅菌並在水浴內保溫45℃的上層軟瓊脂中注入0.1ml菌液；混勻後傾於底平板上並鋪平。平皿倒置於37℃溫箱培養48h。 （5）回變特性——診斷性試驗 上層軟瓊脂中除菌液外，還注入已知陽性物之溶液，需活化系統者並加入S9mix，餘同上。 組氨酸營養缺陷型由自發回變即可知。 2．斑點試驗 吸取測試菌增菌培養後的菌液0.1ml，注入融化並保溫45℃左右的上層軟瓊脂中，需S9活化的再加0.3ml－0.4mlS9mix，立即混勻，傾於底平板上，鋪平冷凝。用滅菌尖頭鑷夾滅菌圓濾紙片邊緣，紙片浸溼受試物溶液，或直接取固態受試物，貼放於上層培養基的表面。同時做溶劑對照和陽性對照，分別貼放於平板上相應位置。平皿倒置於37℃溫箱培養48h。在紙片外圍長出密集菌落圈，為陽性；菌落散佈，密度與自發回變相似，為陰性。 3．平板摻入試驗 將一定量樣液和0.1ml測試菌液均加入上層軟瓊脂中，需代謝活化的再加0.3ml－0.4ml S9mix，混勻後迅速傾於底平板上鋪平冷凝。同時做陰性和陽性對照，每種處理做3個平行。試樣通常設4個～5個劑量。選擇劑量範圍開始應大些，有陽性或可疑陽性結果時，再在較窄的劑量範圍內確定劑量反應關係。培養同上。同一劑量各皿回變菌落均數與各陰性對照皿自發回變菌落均數之比，為致變比（MR）。MR值≥2，且有劑量-反應關係，背景正常，則判為致突變陽性。