重組DNA技術主要包括四個步驟:提取目的基因、目的基因與運載體結合、將目的基因匯入受體細胞、目的基因的檢測和表達。
1、提取目的基因獲取目的基因主要有兩條途徑:一條是從供體細胞的DNA中直接分離基因;另一條是人工合成基因。直接分離基因最常用的方法是“鳥槍法”,又叫“散彈射擊法”。
3、將目的基因匯入受體細胞用人工方法使體外重組的DNA分子轉移到受體細胞,主要是借鑑細菌或病毒侵染細胞的途徑。目的基因匯入受體細胞後,就可以隨著受體細胞的繁殖而複製,由於細菌的繁殖速度非常快,在很短的時間內就能夠獲得大量的目的基因。
4、目的基因的檢測和表達目的基因匯入受體細胞後,是否可以穩定維持和表達其遺傳特性,只有透過檢測與鑑定才能知道。受體細胞必須表現出特定的性狀,才能說明目的基因完成了表達過程。擴充套件資料重組DNA技術是指將一種生物體(供體)的基因與載體在體外進行拼接重組,然後轉入另一種生物體(受體)內,使之按照人們的意願穩定遺傳並表達出新產物或新性狀的DNA體外操作程式,也稱為分子克隆技術。因此,供體、受體、載體是重組DNA技術的三大基本元件。重組DNA技術使用的酶有限制性核酸內切酶、DNA連線酶。常用的載體有質粒載體、噬菌體載體、Ti質粒、人工染色體。
重組DNA技術主要包括四個步驟:提取目的基因、目的基因與運載體結合、將目的基因匯入受體細胞、目的基因的檢測和表達。
1、提取目的基因獲取目的基因主要有兩條途徑:一條是從供體細胞的DNA中直接分離基因;另一條是人工合成基因。直接分離基因最常用的方法是“鳥槍法”,又叫“散彈射擊法”。
3、將目的基因匯入受體細胞用人工方法使體外重組的DNA分子轉移到受體細胞,主要是借鑑細菌或病毒侵染細胞的途徑。目的基因匯入受體細胞後,就可以隨著受體細胞的繁殖而複製,由於細菌的繁殖速度非常快,在很短的時間內就能夠獲得大量的目的基因。
4、目的基因的檢測和表達目的基因匯入受體細胞後,是否可以穩定維持和表達其遺傳特性,只有透過檢測與鑑定才能知道。受體細胞必須表現出特定的性狀,才能說明目的基因完成了表達過程。擴充套件資料重組DNA技術是指將一種生物體(供體)的基因與載體在體外進行拼接重組,然後轉入另一種生物體(受體)內,使之按照人們的意願穩定遺傳並表達出新產物或新性狀的DNA體外操作程式,也稱為分子克隆技術。因此,供體、受體、載體是重組DNA技術的三大基本元件。重組DNA技術使用的酶有限制性核酸內切酶、DNA連線酶。常用的載體有質粒載體、噬菌體載體、Ti質粒、人工染色體。