因為由於葉綠素皂化反應後的葉綠素鹽並不影響葉綠素分子的骨架結構,葉綠素對光的吸收規律與葉綠素鹽對光的吸收規律幾乎是相同的,而且皂化反應可以從葉綠體色素中只篩選出葉綠素,排除了其他色素的干擾,所以可用皂化後的葉綠素鹽來測定葉綠素的吸收光譜。葉綠素(chlorophyll)是一類與光合作用(photosynthesis)有關的最重要的色素。光合作用是透過合成一些有機化合物將光能轉變為化學能的過程。葉綠素實際上存在於所有能營造光合作用的生物體,包括綠色植物、原核的藍綠藻(藍菌)和真核的藻類。葉綠素從光中吸收能量,然後能量被用來將二氧化碳轉變為碳水化合物。提取葉綠素提取的準備工作是在一個半暗的房間裡,室溫保持在25℃。提取步驟如下:(1) 取1000克新鮮的綠葉,在韋氏攪切器中粉碎。(2)將粉碎的1000克綠葉放進加有少量的碳酸鈣的丙酮中(溫度20℃)進行萃取,直到過濾、清洗後的葉子碎片為無色。(3)將過濾後的丙酮提取液放到盛有1升石油醚和100ml丙酮的漏斗中,然後輕輕地旋轉,同時加放蒸餾水直到分層為止。水層的大部分丙酮和水溶雜質被丟棄,只剩石油醚溶液。(4)將石油醚溶液用蒸餾水再次淨化後,用含有石油醚和0.01克草酸的200ml80%的甲醇溶液清洗5次以上,最後得到黃綠色懸浮液。(5)用無水硫酸鈉對懸浮液進行乾燥,並將其滲入到3cm厚的蔗糖粉末製成柱中,然後用石油醚清洗沉澱的色素去掉類胡蘿蔔素,使之只含有天然的葉綠素。(6)含有天然葉綠素的蔗糖柱分兩層,綠層有4-10mm的葉綠素b層,另一藍層為2-6mm的葉綠素a層。(7)將位於藍層正中的部分(約佔藍層的一半) 放入醚中,對此懸浮液進行過濾、洗提,用蒸餾水清洗,用硫酸鈉乾燥,再用器皿進行過濾後,得到葉綠素a。(8)將(6)中的綠層中間部分移出,迅速放入醚中過濾、洗提,製成葉綠素b醚溶液。
因為由於葉綠素皂化反應後的葉綠素鹽並不影響葉綠素分子的骨架結構,葉綠素對光的吸收規律與葉綠素鹽對光的吸收規律幾乎是相同的,而且皂化反應可以從葉綠體色素中只篩選出葉綠素,排除了其他色素的干擾,所以可用皂化後的葉綠素鹽來測定葉綠素的吸收光譜。葉綠素(chlorophyll)是一類與光合作用(photosynthesis)有關的最重要的色素。光合作用是透過合成一些有機化合物將光能轉變為化學能的過程。葉綠素實際上存在於所有能營造光合作用的生物體,包括綠色植物、原核的藍綠藻(藍菌)和真核的藻類。葉綠素從光中吸收能量,然後能量被用來將二氧化碳轉變為碳水化合物。提取葉綠素提取的準備工作是在一個半暗的房間裡,室溫保持在25℃。提取步驟如下:(1) 取1000克新鮮的綠葉,在韋氏攪切器中粉碎。(2)將粉碎的1000克綠葉放進加有少量的碳酸鈣的丙酮中(溫度20℃)進行萃取,直到過濾、清洗後的葉子碎片為無色。(3)將過濾後的丙酮提取液放到盛有1升石油醚和100ml丙酮的漏斗中,然後輕輕地旋轉,同時加放蒸餾水直到分層為止。水層的大部分丙酮和水溶雜質被丟棄,只剩石油醚溶液。(4)將石油醚溶液用蒸餾水再次淨化後,用含有石油醚和0.01克草酸的200ml80%的甲醇溶液清洗5次以上,最後得到黃綠色懸浮液。(5)用無水硫酸鈉對懸浮液進行乾燥,並將其滲入到3cm厚的蔗糖粉末製成柱中,然後用石油醚清洗沉澱的色素去掉類胡蘿蔔素,使之只含有天然的葉綠素。(6)含有天然葉綠素的蔗糖柱分兩層,綠層有4-10mm的葉綠素b層,另一藍層為2-6mm的葉綠素a層。(7)將位於藍層正中的部分(約佔藍層的一半) 放入醚中,對此懸浮液進行過濾、洗提,用蒸餾水清洗,用硫酸鈉乾燥,再用器皿進行過濾後,得到葉綠素a。(8)將(6)中的綠層中間部分移出,迅速放入醚中過濾、洗提,製成葉綠素b醚溶液。