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  • 1 # mopsy4412

    1、280nm的光吸收法用標準曲線法進行測定。標準蛋白質溶液配製的濃度為1.0 mg/mL。常用的標準蛋白質為牛血清清蛋白(BSA)。

    2、280 nm和260 nm的吸收差法核酸對紫外光有很強的吸收,在280 nm處的吸收比蛋白質強10倍(每克),但核酸在260 nm處的吸收更強,其吸收高峰在260 nm附近。核酸260 nm處的消光係數是280 nm處的2倍;而蛋白質則相反,其280 nm的紫外吸收值大於260 nm的吸收值。

    3、215 nm與225 nm的吸收差法蛋白質的稀溶液由於含量低而不能使用280 nm的光吸收測定時,可用215nm與225 nm吸收值之差,透過標準曲線法來測定蛋白質稀溶液的濃度。

    4、肽鍵測定法蛋白質溶液在238 nm處的光吸收的強弱,與肽鍵的多少成正比。因此可以用標準蛋白質溶液配製一系列50~500 mg/mL已知濃度的5.0 mL蛋白質溶液,測定238 nm的光吸收值A238,以A238為縱座標,蛋白質含量為橫座標,繪製出標準曲線。未知樣品的濃度即可由標準曲線求得。擴充套件資料:紫外分光光度法原理光譜法(spectrometry)是基於物質與電磁輻射作用時,測量由物質內部發生量子化的能級之間的躍遷而產生的發射、吸收或散射輻射的波長和強度進行分析的方法。光譜法可分為發射光譜法、吸收光譜法、散射光譜法;或分為原子光譜法和分子光譜法;或分為能級譜,電子、振動、轉動光譜,電子自旋及核自旋譜等。分光光度法是光譜法的重要組成部分,是透過測定被測物質在特定波長處或一定波長範圍內的吸光度或發光強度,對該物質進行定性和定量分析的方法。常用的技術包括紫外-可見分光光度法、紅外分光光度法、熒光分光光度法和原子吸收分光光度法等。紫外-可見分光光度法是在190~800nm波長範圍內測定物質的吸光度,用於鑑別、雜質檢查和定量測定的方法。

  • 2 # 使用者6284825556109

    如何知道待測溶液在哪濃度範圍內與吸光度有較好的線性關係?不知道,查閱資料如何求標準曲線的迴歸方程和線性相關係數 r?高中數學問題b=(sigma xy - nxy)/(sigma x^2 - n x^2)a=y-bx其中x , y 表示平均數,sigma是求和符號

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