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  • 1 # 使用者3346538884179

    第一、安捷倫的色譜柱有很多種,所以要分清型別去沖洗。

    第二、作為普通C18柱,尤其是矽膠基質的普通C18柱,對酸鹼鹽以及水,都是造成柱子的損壞的流動相構成。水不能過多(除了帶AQ的純水柱,一般各家品牌都有這款防水柱)我個人認為只要超過80%的水的流動相,都會造成C18的壽命縮短。所以做高水相的流動相分析時請注意選合適的柱子。酸對柱子的損傷是不可逆的,一定要控制PH,我個人認為PH在2以下的都要做好費柱子的準備。鹼性條件是對於矽膠基質的C18的弱項,一般的矽膠基質的C18鹼性條件都不太耐用,但現在也有鹼性PH11的柱子,但比較貴。鹽對色譜柱的影響主要是鹽析造成的,而且是致命。

    第三沖洗方法的問題。沖洗方法根據使用的流動相和樣品的不同沖洗方法要加以區分。一般不加酸鹼鹽,水相也不高的情況(如甲醇水60:40),無需太過沖洗,沖洗的目的就是為了把樣品的雜質衝出即可。儲存流動相儲存即可。酸和鹼的條件下,原則上是將酸鹼衝出色譜柱,儲存在甲醇水即可(如60:40比例可根據要使用的流動相,只要水相不高即可)。鹽的條件比較麻煩,處理不好,不僅僅色譜柱出問題而且儀器也比較麻煩。常用的就是高水相流動相甲醇-水(10:90)將鹽衝出(注意壓力),然後用純甲醇沖洗(這一步是恢復高水相對色譜柱的損傷),最後儲存在一般的甲醇水體系即可。

    第四點,沖洗的時候注意是壓力,最好是從小流速開始慢慢提升流速到壓力許可的範圍。沖洗的時間,準確的是流量一般色譜柱的沖洗都要達到10-20倍的柱體積。

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