也可以取少許酶切樣品檢測，發現單酶切切得很完全，就可直接用此樣品純化後做轉化。gundamba(站內聯絡TA)做個電泳就可以了，首先，線性化的質粒跑的比酶切之前的質粒慢，再者，線性化的質粒同MARKER比較，顯示的是真實的大小，可以看你質粒大小來區分crab1983(站內聯絡TA)我酶切之後的質粒跑的比質粒快，是兩條帶能分出大小，這個質粒上有兩個我用來線性化酶的酶切位點，所以我現在分不清這種情況是不是單酶切的結果。susizheng(站內聯絡TA)Originally posted by crab1983 at 2010-04-12 09:31:44: 我酶切之後的質粒跑的比質粒快，是兩條帶能分出大小，這個質粒上有兩個我用來線性化酶的酶切位點，所以我現在分不清這種情況是不是單酶切的結果。你用的是哪個載體？一般線性化都是選擇單一的酶切位點進行單交換重組的，你要切下整個表達元件做雙交換？那肯定是要做回收的。另外的話，根據maker應該知道哪條是你需要的帶，然後回收就可以了。
fungixx(站內聯絡TA)你可以同時做一個對照 使用你的酶之外的另一種容易切割的酶和這種酶進行雙酶切，這樣就能判斷是否完全切割吧liu2007(站內聯絡TA)單酶切後，因為單酶切的質粒為線狀構象，而沒切開的質粒為環狀，電泳能完全分開這兩種構象，再回收線性化的條帶用於轉化就可以了。
也可以取少許酶切樣品檢測，發現單酶切切得很完全，就可直接用此樣品純化後做轉化。gundamba(站內聯絡TA)做個電泳就可以了，首先，線性化的質粒跑的比酶切之前的質粒慢，再者，線性化的質粒同MARKER比較，顯示的是真實的大小，可以看你質粒大小來區分crab1983(站內聯絡TA)我酶切之後的質粒跑的比質粒快，是兩條帶能分出大小，這個質粒上有兩個我用來線性化酶的酶切位點，所以我現在分不清這種情況是不是單酶切的結果。susizheng(站內聯絡TA)Originally posted by crab1983 at 2010-04-12 09:31:44: 我酶切之後的質粒跑的比質粒快，是兩條帶能分出大小，這個質粒上有兩個我用來線性化酶的酶切位點，所以我現在分不清這種情況是不是單酶切的結果。你用的是哪個載體？一般線性化都是選擇單一的酶切位點進行單交換重組的，你要切下整個表達元件做雙交換？那肯定是要做回收的。另外的話，根據maker應該知道哪條是你需要的帶，然後回收就可以了。