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  • 1 # 王小佳的慧慧

    分光光度計和酶標儀都是實驗室常用的兩種儀器,它們的測定原理是相同的,都是使用朗伯-比耳定律,測定的都是樣本的吸光度。酶標儀按照功能的不同劃分,可以分為(1)光吸收酶標儀(可見酶標儀,紫外/可見酶標儀)(2)熒光酶標儀(3)化學發光酶標儀。分光光度計按照波長及應用領域的不同可以分為:(1)可見光分光光度計(2)紫外分光光度計(3)紅外分光光度計(4)熒光分光光度計(5)原子吸收分光光度計。分光光度計和酶標板存在一些不同之處,具體差別體現在以下三個方面:(1)盛裝待測溶液的容器:分光光度計用的是比色皿,酶標儀使用的是塑膠微孔板(酶標板)。比色皿只能起到盛裝溶液的作用,每個比色皿一次只能盛裝一種溶液。酶標板常用透明的聚乙烯材料製成,對抗原抗體有較強的吸附作用,因此用它作為固相載體,酶標板通常為48孔或96孔,每個微孔可以盛裝不同的溶液。(2)光路的方向:分光光度計是水平光路,而酶標儀則是垂直光路。由於酶標板盛樣本的塑膠微孔板是多排多孔的,光線只能垂直穿過,因此酶標儀的光束都是垂直透過待測溶液和微孔板的,光束既可是從上到下,也可以是從下到上穿過比色液。垂直光的特點是標本吸光度受液體濃縮或稀釋的影響小,不足之處是受被測樣本液麵是否水平、酶標板透光性、孔底是否平整等的影響較大。(3)光路的長度:由於光密度(OD值)與吸光係數, 待測組分的濃度以及光路長度成正比關係。分光光度計採用的比色杯的寬度通常是1cm,所以光路長度固定為1cm。因此不同儀器,不同批次測量的資料具有同樣的可比性。而酶標儀採用的是垂直光路, 所以光路的長度應該是液體液麵的高度。所以測得的值受到樣品的體積的影響。

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