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    聚丙烯醯胺凝膠電泳(英語: polyacrylamide gelelectrophoresis,簡稱PAGE) 作用:用於分離蛋白質和寡核苷酸。聚丙烯醯胺凝膠是由丙烯醯胺(簡稱Acr)和交聯劑N,N’一亞甲基雙丙烯醯胺(簡稱Bis)在催化劑過硫酸銨(AP),N,N,N’,N’ 四甲基乙二胺(TEMED)作用下,聚合交聯向成的具有網狀立體結構的凝膠,並以此為支援物進行電泳。

    聚丙烯醯胺凝膠電泳可根據不同蛋白質分子所帶電荷的差異及分子大小的不同所產生的不同遷移率將蛋白質分離成若干條區帶,如果分離純化的樣品中只含有同一種蛋白質,蛋白質樣品電泳後,就應只分離出一條區帶。聚丙烯醯胺凝膠為網狀結構,具有分子篩效應。它有兩種形式:非變性聚丙烯醯胺凝膠電泳(Native-PAGE)及SDS-聚丙烯醯胺凝膠(SDS-PAGE);非變性聚丙烯醯胺凝膠,在電泳的過程中,蛋白質能夠保持完整狀態,並依據蛋白質的分子量大小、蛋白質的形狀及其所附帶的電荷量而逐漸呈梯度分開。

    SDS-PAGE僅根據蛋白質亞基分子量的不同就可以分開蛋白質。該技術最初由shapiro於1967年建立,他們發現在樣品介質和丙烯醯胺凝膠中加入離子去汙劑和強還原劑(SDS即十二烷基硫酸鈉)後,蛋白質亞基的電泳遷移率主要取決於亞基分子量的大小(可以忽略電荷因素)。

    SDS是一種陰離子表面活性劑能打斷蛋白質的氫鍵和疏水鍵,並按一定的比例和蛋白質分子結合成複合物,使蛋白質帶負電荷的量遠遠超過其本身原有的電荷,掩蓋了各種蛋白分子間天然的電荷差異。因此,各種蛋白質 SDS複合物在電泳時的遷移率,不再受原有電荷和分子形狀的影響,只是棒長的函式。這種電泳方法稱為SDS聚丙烯醯胺凝膠電泳(簡稱SDS—PAGE)。由於SDS PAGE可設法將電泳時蛋白質電荷差異這一因素除去或減小到可以忽略不計的程度,因此常用來鑑定蛋白質分離樣品的純化程度,如果被鑑定的蛋白質樣品很純,只含有一種具三級結構的蛋白質或含有相同分子量亞基的具四級結構的蛋白質,那麼 SDS—PAGE後,就只出現一條蛋白質區帶。SDS—PAGE可分為圓盤狀和垂直板狀、連續系統和不連續系統。本實驗採用垂直板狀不連續系統。所謂“不連續”是指電泳體系由兩種或兩種以上的緩衝液、pH和凝膠孔徑等所組成。

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