(1)二甲苯（Ⅰ） 15min (2) 二甲苯（Ⅱ） 15 min (3)100%乙醇（Ⅰ） 5min (4)100%乙醇（Ⅱ） 5 min (5)80%乙醇 5min (6)蒸餾水 5 min (7)蘇木精液染色 5 min (8 ) 流水稍洗去蘇木精液 1-3 s (9) 1%鹽酸乙醇 1-3 s (10) 稍水洗 10-30 s (13)蒸餾水過洗 1-2 s (14) 0.5%伊紅液染色 1-3 min (15) 蒸餾水稍洗 1-2 s (16) 80%乙醇稍洗 1-2 s (17) 95%乙醇（Ⅰ） 2-3 s (18) 95%乙醇（Ⅱ） 3-5 s (19) 無水乙醇 5-10 min (20) 石炭酸二甲苯 5-10 min (21) 二甲苯（Ⅰ） 2 min (22) 二甲苯（Ⅱ） 2 min (23) 二甲苯（Ⅲ） 2 min (24) 中性樹膠封固 注：①第（10）、（11）步可省去，（12）步沖水時間需延長至20-30min。 ②第（20）步如果不用石炭酸二甲苯，可改用無水乙醇。 * 冷凍切片HE染色步驟： （1）冰凍切片固定 10～30 s （2）稍水洗 1～2 s （3）蘇木精液染色（60℃） 30～60 s （4）流水洗去蘇木精液 5～10 s （5）1%鹽酸乙醇 1～3 s （6）稍水洗 1～2 s （7）促藍液返藍 5～10 s （8）流水沖洗 15～30 s （9）0.5%曙紅液染色 30～60 s （10）蒸餾水稍洗 1～2 s （11）80%乙醇 1～2 s （12）95%乙醇 1～2 s （13）無水乙醇 1～2 s （14）石炭酸二甲苯 2～3 s （15）二甲苯（Ⅰ） 2～3 s （16）二甲苯（Ⅱ） 2～3 s （17）中性樹膠封固。 注：第（14）步如果不用石炭酸二甲苯，可改用無水乙醇。 染色結果：細胞核藍色，胞質、肌纖維、膠原纖維和紅細胞呈深淺不一的紅色。 4．12 切片脫水透明 切片經HE染色後，要徹底脫水透明，才能用中性樹膠封蓋。如果脫水不徹底，封片後呈白色霧狀，鏡下觀察模糊不清，且容易褪色。切片1-2級無水乙醇脫水，也可使用石碳酸二甲苯進行脫水。石碳酸有較強脫水能力，但長時間可使切片脫色，因此要經過多次二甲苯以使石碳酸完全除去。
染色流程
(1)二甲苯（Ⅰ） 15min (2) 二甲苯（Ⅱ） 15 min (3)100%乙醇（Ⅰ） 5min (4)100%乙醇（Ⅱ） 5 min (5)80%乙醇 5min (6)蒸餾水 5 min (7)蘇木精液染色 5 min (8 ) 流水稍洗去蘇木精液 1-3 s (9) 1%鹽酸乙醇 1-3 s (10) 稍水洗 10-30 s (13)蒸餾水過洗 1-2 s (14) 0.5%伊紅液染色 1-3 min (15) 蒸餾水稍洗 1-2 s (16) 80%乙醇稍洗 1-2 s (17) 95%乙醇（Ⅰ） 2-3 s (18) 95%乙醇（Ⅱ） 3-5 s (19) 無水乙醇 5-10 min (20) 石炭酸二甲苯 5-10 min (21) 二甲苯（Ⅰ） 2 min (22) 二甲苯（Ⅱ） 2 min (23) 二甲苯（Ⅲ） 2 min (24) 中性樹膠封固 注：①第（10）、（11）步可省去，（12）步沖水時間需延長至20-30min。 ②第（20）步如果不用石炭酸二甲苯，可改用無水乙醇。 * 冷凍切片HE染色步驟： （1）冰凍切片固定 10～30 s （2）稍水洗 1～2 s （3）蘇木精液染色（60℃） 30～60 s （4）流水洗去蘇木精液 5～10 s （5）1%鹽酸乙醇 1～3 s （6）稍水洗 1～2 s （7）促藍液返藍 5～10 s （8）流水沖洗 15～30 s （9）0.5%曙紅液染色 30～60 s （10）蒸餾水稍洗 1～2 s （11）80%乙醇 1～2 s （12）95%乙醇 1～2 s （13）無水乙醇 1～2 s （14）石炭酸二甲苯 2～3 s （15）二甲苯（Ⅰ） 2～3 s （16）二甲苯（Ⅱ） 2～3 s （17）中性樹膠封固。 注：第（14）步如果不用石炭酸二甲苯，可改用無水乙醇。 染色結果：細胞核藍色，胞質、肌纖維、膠原纖維和紅細胞呈深淺不一的紅色。 4．12 切片脫水透明 切片經HE染色後，要徹底脫水透明，才能用中性樹膠封蓋。如果脫水不徹底，封片後呈白色霧狀，鏡下觀察模糊不清，且容易褪色。切片1-2級無水乙醇脫水，也可使用石碳酸二甲苯進行脫水。石碳酸有較強脫水能力，但長時間可使切片脫色，因此要經過多次二甲苯以使石碳酸完全除去。