米氏方程 v=Vmax×[S]/（Km+[S])，這個方程稱為Michaelis-Menten方程，是在假定存在一個穩態反應條件下推匯出來的，其中 Km 值稱為米氏常數，Vmax是酶被底物飽和時的反應速度，[S]為底物濃度。由此可見Km值的物理意義為反應速度（v）達到1/2Vmax時的底物濃度（即Km=[S]），單位一般為mol/L，只由酶的性質決定，而與酶的濃度無關。可用Km的值鑑別不同的酶。當底物濃度非常大時，反應速度接近於一個恆定值。在曲線的這個區域，酶幾乎被底物飽和，反應相對於底物S是個零級反應。就是說再增加底物對反應速度沒有什麼影響。反應速度逐漸趨近的恆定值稱為最大反應速度Vmax。對於給定酶量的Vmax可以定義為處於飽和底物濃度的起始反應速度n。對於反應曲線的這個假一級反應區的速度方程可寫成一種等價形式： n（飽和時）=Vmax=k[E][S]0=k[E]total=k cat[ES] 速度常數k等於催化常數k cat，k cat是ES轉化為遊離的E和產物的速度常數。飽和時，所有的E都是以ES存在。方程（3.2）中還有另一個簡單的關係式：Vmax=k cat [E]total。從中得出：k cat=Vmax / [E]total。k cat的單位是s－1。催化常數可以衡量一個酶促反應的快慢。 米氏常數Km是酶促反應速度n為最大酶促反應速度值一半時的底物濃度。這可透過用[S]取代米氏方程中的Km證明，透過計算可得n=Vmax /2。Km和Vmax的意義 ①當ν=Vmax/2時，Km=[S]。因此，Km等於酶促反應速度達最大值一半時的底物濃度。 ②當k-1>>k+2時，Km=k-1/k+1=Ks。因此，Km可以反映酶與底物親和力的大小，即Km值越小，則酶與底物的親和力越大；反之，則越小。 ③Km可用於判斷反應級數：當[S]<0.01Km時，ν=（Vmax/Km）[S]，反應為一級反應，即反應速度與底物濃度成正比；當[S]>100Km時，ν=Vmax，反應為零級反應，即反應速度與底物濃度無關；當0.01Km<[S]<100Km時，反應處於零級反應和一級反應之間，為混合級反應。 ④Km是酶的特徵性常數：在一定條件下，某種酶的Km值是恆定的，因而可以透過測定不同酶（特別是一組同工酶）的Km值，來判斷是否為不同的酶。 ⑤Km可用來判斷酶的最適底物：當酶有幾種不同的底物存在時，Km值最小者，為該酶的最適底物。 ⑥Km可用來確定酶活性測定時所需的底物濃度：當[S]=10Km時，ν=91%Vmax，為最合適的測定酶活性所需的底物濃度。 ⑦Vmax可用於酶的轉換數的計算：當酶的總濃度和最大速度已知時，可計算出酶的轉換數，即單位時間內每個酶分子催化底物轉變為產物的分子數。 ⑷Km和Vmax的測定：主要採用Lineweaver-Burk雙倒數作圖法和Hanes作圖法。雙倒數作圖 酶促反應中的Km和Vmax值有幾種測量方法。固定反應中的酶濃度，然後分析幾種不同底物濃度下的起始速度，就可獲得Km和Vmax值。但直接從起始速度對底物濃度的圖中確定Km或Vmax值是很困難的，因為曲線接近Vmax時是個漸進過程。所以通常都是利用米氏方程的轉換形式求出Km和Vmax值。常用的米氏方程轉換形式是Lineweaver-Burk方程，也稱為雙倒數方程。 使1/ v 對1/[S]作圖，可以獲得一條直線。從直線與x軸的截距可以得到1/Km的絕對值；而1/Vmax是直線與y軸的截距。雙倒數作圖直觀、容易理解，為酶抑制研究提供了易於識別的圖形。抑制作用的影響競爭性抑制 Km值增大，Vmax值不變非競爭性抑制 Km值不變，Vmax值變小反競爭性抑制 Km值變小，Vmax值變小，但Vmax/Km值不變
米氏方程 v=Vmax×[S]/（Km+[S])，這個方程稱為Michaelis-Menten方程，是在假定存在一個穩態反應條件下推匯出來的，其中 Km 值稱為米氏常數，Vmax是酶被底物飽和時的反應速度，[S]為底物濃度。由此可見Km值的物理意義為反應速度（v）達到1/2Vmax時的底物濃度（即Km=[S]），單位一般為mol/L，只由酶的性質決定，而與酶的濃度無關。可用Km的值鑑別不同的酶。當底物濃度非常大時，反應速度接近於一個恆定值。在曲線的這個區域，酶幾乎被底物飽和，反應相對於底物S是個零級反應。就是說再增加底物對反應速度沒有什麼影響。反應速度逐漸趨近的恆定值稱為最大反應速度Vmax。對於給定酶量的Vmax可以定義為處於飽和底物濃度的起始反應速度n。對於反應曲線的這個假一級反應區的速度方程可寫成一種等價形式： n（飽和時）=Vmax=k[E][S]0=k[E]total=k cat[ES] 速度常數k等於催化常數k cat，k cat是ES轉化為遊離的E和產物的速度常數。飽和時，所有的E都是以ES存在。方程（3.2）中還有另一個簡單的關係式：Vmax=k cat [E]total。從中得出：k cat=Vmax / [E]total。k cat的單位是s－1。催化常數可以衡量一個酶促反應的快慢。 米氏常數Km是酶促反應速度n為最大酶促反應速度值一半時的底物濃度。這可透過用[S]取代米氏方程中的Km證明，透過計算可得n=Vmax /2。Km和Vmax的意義 ①當ν=Vmax/2時，Km=[S]。因此，Km等於酶促反應速度達最大值一半時的底物濃度。 ②當k-1>>k+2時，Km=k-1/k+1=Ks。因此，Km可以反映酶與底物親和力的大小，即Km值越小，則酶與底物的親和力越大；反之，則越小。 ③Km可用於判斷反應級數：當[S]<0.01Km時，ν=（Vmax/Km）[S]，反應為一級反應，即反應速度與底物濃度成正比；當[S]>100Km時，ν=Vmax，反應為零級反應，即反應速度與底物濃度無關；當0.01Km<[S]<100Km時，反應處於零級反應和一級反應之間，為混合級反應。 ④Km是酶的特徵性常數：在一定條件下，某種酶的Km值是恆定的，因而可以透過測定不同酶（特別是一組同工酶）的Km值，來判斷是否為不同的酶。 ⑤Km可用來判斷酶的最適底物：當酶有幾種不同的底物存在時，Km值最小者，為該酶的最適底物。 ⑥Km可用來確定酶活性測定時所需的底物濃度：當[S]=10Km時，ν=91%Vmax，為最合適的測定酶活性所需的底物濃度。 ⑦Vmax可用於酶的轉換數的計算：當酶的總濃度和最大速度已知時，可計算出酶的轉換數，即單位時間內每個酶分子催化底物轉變為產物的分子數。 ⑷Km和Vmax的測定：主要採用Lineweaver-Burk雙倒數作圖法和Hanes作圖法。雙倒數作圖 酶促反應中的Km和Vmax值有幾種測量方法。固定反應中的酶濃度，然後分析幾種不同底物濃度下的起始速度，就可獲得Km和Vmax值。但直接從起始速度對底物濃度的圖中確定Km或Vmax值是很困難的，因為曲線接近Vmax時是個漸進過程。所以通常都是利用米氏方程的轉換形式求出Km和Vmax值。常用的米氏方程轉換形式是Lineweaver-Burk方程，也稱為雙倒數方程。 使1/ v 對1/[S]作圖，可以獲得一條直線。從直線與x軸的截距可以得到1/Km的絕對值；而1/Vmax是直線與y軸的截距。雙倒數作圖直觀、容易理解，為酶抑制研究提供了易於識別的圖形。抑制作用的影響競爭性抑制 Km值增大，Vmax值不變非競爭性抑制 Km值不變，Vmax值變小反競爭性抑制 Km值變小，Vmax值變小，但Vmax/Km值不變