光照在植物組織培養中起著重要的作用。其對培養物的葉綠體生成、形態結構的發育建成、生長速度、種苗質量甚至培養成功與否都起著決定性作用。可以說沒有優質的光照條件就不可能有組培的成功。光線在組培過程中主要透過光通量密度、光波長、光週期三個因素共同決定培養物的生長髮育。

目前大家對於植物組培補光中對光線的定量常用單位是光強度（lux）。這個單位也是照明行業中常用的一個度量單位。它主要反映的是我們肉眼所能感覺到的波長（390nm到約700nm）的輻射能。但是使用光照強度來描述光照對植物的效應並不理想，特別是對於LED光源的描述就更加的不準確。這是因為植物色素對不同波段的輻射能量不具有像人眼一樣的相應的敏感性。比如同樣是1000μmol·m-2·s-1的光量子通量密度，人眼較為敏感的綠光lux就更大，而人眼不敏感的紅光lux就會比較小，而紅光恰恰是對光合作用比較重要的波段。因此不同的光譜構成對光強度的影響很大，這也是混合光LED燈照度偏低的主要原因。所以對於組培補光光線較好的定量辦法是利用物理學的語言來解釋或定義。常用的單位為光量子通量密度（μmol·m-2·s-1）。

研究表明大多數植物組織培養物在40---100μmol·m-2·s-1的光量子通量密度條件下，都可以正常生長。同時在一定的範圍內隨著輻射度的增加培養效果也會進一步變好，而且諸如玻璃化等問題也會隨之消失。一直以來組培過程中對於輻照度的選擇都是遵循以下幾個原則：

·夠用原則，是指在不影響培養物正常生長的前提下儘可能降低輻照度。以求降低電量的消耗從而降低生產成本。同時因培養物在容器內，避免高的輻照度會誘發溫室效應使容器內溫度過高。

·低熱原則，是指儘可能的選擇散熱量小的冷光源補光裝置。以求能夠減少培養環境溫度的波動，同時減少環境控制的成本。

·散射原則，是指配合培養架的反光層讓光線更加均勻的照射在培養物上。以求光線的利用更加充分，培養物的生長更加均勻一致。