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    簡單染色法:利用單一染料對細菌進行染色的一種方法.例如番紅.

    1.塗片:用灼燒滅菌冷卻後的接種環挑取少量菌體與水滴充分混勻,塗成極薄的菌膜.

    2.乾燥:可自然晾乾,或將塗片置於火焰高處微熱烘乾,但不能直接在火焰上烘烤.

    3.固定:手執玻片一端,有菌膜的一面朝上,透過迅速透過火焰2-3次(用手指觸塗片反面,以不燙手為宜).

    4.染色:加適量(以蓋滿菌膜為度)結晶紫染色液(或石炭酸復紅液),染l~2min.

    5.水洗:用自來沖洗至流下的水中無染色液的顏色時為止.

    6.乾燥

    7.鏡檢 復染色:利用用兩種以上染料對細菌進行染色.例如革蘭氏染色法. 革蘭氏染色法一般包括初染、媒染、脫色、復染等四個步驟,需要鹼性染料(basic dye)初染液;媒染劑(mordant);脫色劑(decolorising agent)和復染液(counterstain).   鹼性染料初染液的象在細菌的單染色法基本原理中所述的那樣,而用於革蘭氏染色的初染液一般是結晶紫(crystal violet).媒染劑的作用是增加染料和細胞之間的親和性或附著力,即以某種方式幫助染料固定在細胞上,使不易脫落,碘(iodine )是常用的媒染劑.脫色劑是將被染色的細胞進行脫色,不同型別的細胞脫色反應不同,有的能被脫色,有的則不能,脫色劑常用95%的酒精(ethanol).復染液也是一種鹼性染料,其顏色不同於初染液,復染的目的是使被脫色的細胞染上不同於初染液的顏色,而未被脫色的細胞仍然保持初染的顏色,而且將細胞區分成G+和G-兩大類群,常用的復染液為番紅. 1.載玻片固定.在無菌操作條件下,用接種環挑取少量細菌於乾淨的載玻片上塗布均勻,在火焰上加熱以殺死菌種並使其粘附固定. 2.草酸銨結晶紫染1分鐘. 3.自來水沖洗,去掉浮色. 4.用碘-碘化鉀溶液媒染1分鐘,傾去多餘溶液. 5.用中性脫色劑如乙醇(95%)或丙酮酸脫色30秒,革蘭氏陽性菌不被褪色而呈紫色,革蘭氏陰性菌被褪色而呈無色. 6.用番紅染液或者沙黃復染30秒,革蘭氏陽性菌仍呈紫色,革蘭氏陰性菌則呈現紅色.

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